Взяття, умови зберігання і доставки венозної крові для проведення ІФА та ПЛР
Головна | Взяття, УМОВИ ЗБЕРІГАННЯ ТА ДОСТАВКИ ВЕНОЗНОЇ КРОВІ ДЛЯ ПРОВЕДЕННЯ ІФА І ПЛР
Взяття венозної крові проводиться натщесерце, в ранкові години. При взятті венозної крові необхідно враховувати ряд факторів які можуть вплинути на результат гематологічних досліджень: фізичне перенапруження (біг, швидка ходьба, підйом по сходах), емоційне збудження, прийом їжі напередодні дослідження, купену, прийом алкоголю і т.д. Для виключення цих чинників, слід дотримуватися таких умов підготовки пацієнтів:
- взяття венозної крові здійснюється після 15-хвилинного відпочинку обстежуваного;
- пацієнт під час взяття сидить, у важких хворих взяття крові може здійснюватися лежачи.
- куріння, прийом алкоголю і їжі безпосередньо перед дослідженням виключаються;
Основний спосіб взяття венозної крові для лабораторного дослідження - пунктирование вени. Венозну кров, як правило, забирають з ліктьової вени. У разі необхідності її можна отримати з будь-якої вени (зап'ястя, тилу долоні, над великим пальцем і т.д.). У новонароджених і грудних дітей кров зазвичай береться з лобової, скроневої або яремної вени.
При взятті крові з вени необхідно уникати: місць шрамів, гематом; вен, які використовуються для переливання розчинів; ножних вен (у хворих на діабет, при порушеннях периферичного кровотоку, ангіопатія).
Для венепункции можна використовувати три варіанти пункцій систем:
- одноразові пластикові системи (вакутейнер), що складаються з контейнера з навинчивающейся на нього одноразовою голкою і пробірки з щільно прилягає пробкою і вакуумом всередині;
- одноразові шприци з відповідним діаметром голки;
- голки з внутрішнім діаметром 0,55-0,65 мм.
Умови транспортування венозної крові
Правильно зібрана венозна кров повинна бути своєчасно доставлена в лабораторію. При кімнатній температурі час доставки не повинно перевищувати 60 хв після взяття крові. Якщо доставка крові до лабораторії здійснюється протягом дня, то вона зберігається при температурі + 40С- + 60С (в холодильнику) і далі в спеціальних транспортних контейнерах в крижаній бані доставляється в лабораторію.
Під час транспортування пробірки і контейнери з кров'ю повинні бути відповідним чином захищені від шкідливого впливу навколишнього середовища і погодних умов. При транспортуванні венозної крові повинні суворо дотримуватися правил техніки безпеки, асептики і антисептики.
Пробірки повинні бути промарковані, упаковані і щільно закриті. Упаковка повинна бути зручною для транспортування. Терміни зберігання залежать від досліджуваного показника, температури зберігання і антикоагулянту, за допомогою якого здійснюється взяття крові.
Методика отримання сироватки крові (без використання розділових або допоміжних засобів для центрифугування)
- Центрифужні скляні пробірки загальним обсягом 10-12 мл.
- Скляні палички або Пастерівські піпетки з запаяними на кінці капілярами (для відділення згустку).
- Центрифуга лабораторна (до 3000 об / хв).
Венозна кров, отримана без антикоагулянтів в центрифужную скляну колбу, відстоюється в ній при кімнатній температурі (15-200С) протягом 30 хвилин до повного утворення згустку. Після закінчення освіти згустку пробірки відкривають і обережно проводять тонкою скляною паличкою або запаяним капилляром Пастерівської піпетки по внутрішніх стінках пробірки по колу в верхньому шарі крові для відділення стовпчика згустку від стінок пробірки. Сироватку зливають в іншу центрифужную пробірку, притримуючи згусток скляною паличкою, і центрифугують, або центрифугують тих же, первинних, пробірках.
Після ретракції згустку проби центрифугують при відносній відцентрової сили RCF від 1000 до 1200 xg (максимально до 1500 xg) протягом 10 хвилин.
У разі використання мікропробірок і центрифуги для них центрифугування проводять при 6000-15000 xg протягом 1,5 хвилин. Після центрифугування сироватку зливають у вторинні (транспортні) пробірки. Сироватка не повинна бути гемолизированной.
Плазма виходить з крові шляхом відділення клітин крові. Вона являє собою безклітинну надосадову рідину, яка виходить при центрифугуванні крові, згортання якої інгібувати додаванням антикоагулянтів негайно після взяття. У плазмі містяться фактори згортання крові. У зв'язку з тим, що плазма і сироватка містять близько 93% води, на відміну від цільної крові, яка містить близько 81% води, концентрація компонентів в плазмі на 12% вище, ніж в цільної крові. Це може мати важливе діагностичне значення при дослідженні активності, наприклад ЛДГ у якого найбільш висока концентрація спостерігається в сироватці крові, ніж в плазмі.
Широко застосовуються комерційні системи для отримання плазми. Вони являють собою пробірки або пристрої типу шприців ( "вакутейнер") з вакуумом всередині, що містять різні антикоагулянти і / або інгібітори гліколізу. Як і в разі пристроїв для сироватки, ці пробірки для плазми мають різні варіанти, що містять розділові гелі і гранулят з полістиролу, що прискорюють отримання плазми, що полегшують транспортування і зберігання. У них вже є антикоагулянти і мітки до яких слід набирати кров.
Методика отримання плазми
Венозну кров, отриману з антикоагулянтом негайно після взяття перемішують перевертанням пробірок з кров'ю, закритих кришками, не менше 5 разів. Перемішування має здійснюватися без струшування і піноутворення. Час між початком накладення джгута і змішуванням крові з антикоагулянтом не повинно перевищувати 2 хвилин.
Після врівноваження пробірок з кров'ю, їх центрифугируют при RCF 1000-1200 xg, але не більше 1500 xg, протягом 10-15 хвилин. Плазму негайно зливають в транспортну центрифужную або хімічну пробірку. Пробірку закривають кришкою.
Умови транспортування плазми крові
Правильно отримана і зібрана плазма крові повинна бути своєчасно доставлена в лабораторію. При кімнатній температурі час доставки не повинно перевищувати 24 години. Якщо доставка плазми в лабораторію здійснюється протягом дня, то вона зберігається при температурі +4. +80 (у холодильнику) і далі в спеціальних транспортних контейнерах в крижаній бані доставляється в лабораторію. Для більш тривалого зберігання плазма може бути заморожена при температурі -200С.
Правила транспортування плазми такі ж як і венозної крові.
Інтернет-реєстратура
УВАГА! При виборі зручного для Вас часу, враховуйте, будь ласка, години роботи відповідного процедурного кабінету.