Визначення чутливості enterococcus spp

Ентерококи характеризуються природною стійкістю до багатьох АБП (цефалоспоринів, аміноглікозидів), а клінічне значення спостережуваної in vitro чутливості до тетрацикліну, хлорамфеніколу, макролідів і рифампіцину остаточно не визначено. Таким чином, перелік препаратів, що підлягають включенню до дослідження ентерококів, вельми обмежений (таблиця 15).

При вирішенні питання про необхідність визначення чутливості Enterococcus spp. до АБП вкрай важливо оцінити клінічну значимість цих мікроорганізмів. Так, ентерококи, виділені з нестерильних локусів організму, особливо в складі асоціацій, найчастіше слід розглядати як контамінірующіе або колонізують мікроорганізми, відповідно, визначати чутливість таких штамів до АБП недоцільно. Проводити визначення чутливості необхідно для штамів Enterococcus spp. виділених з крові та інших в нормі стерильних рідин і тканин організму, а також з сечі. При цьому підходи до визначення чутливості цих мікроорганізмів і набори АБП для тестування розрізняються в залежності від джерела виділення штамів (таблиця 15).

Пеніцилін і ампіцилін

Дані антибіотики є препаратами вибору для лікування ентерококових інфекцій. Між пеніциліном і ампіциліном відзначається перехресна резистентність. Отримані результати можна екстраполювати на інгібітори-захищені амінопеніцилінів і уреїдопеніциліни. Описані випадки резистентності ентерококів до пеніцилінів, пов'язані з продукцією бета-лактамаз, резистентні штами слід досліджувати на продукцію пеніцилінази в тесті з нітроцефіном.

аміноглікозиди

Незважаючи на те, що Ентерококи мають природну стійкість до аміноглікозидів, ці препарати широко застосовується в комбінованій терапії генералізованих ентерококових інфекцій. Доцільність таких схем зв'язку з вираженим синергізмом між аміноглікозидами і ампіциліном або ванкоміцином. Синергізм виявляється тільки в тому випадку, якщо МПК аміноглікозидів не перевищує 500 мкг / мл для гентаміцину і 1000 мкг / мл для стрептоміцину. Вказана обставина вимагає проведення скринінгу (методом серійних розведень або ДДМ) на наявність у ентерококів високого рівня резистентності до стрептоміцину і гентаміцину.

ванкоміцин

Ванкоміцин є препаратом вибору для лікування інфекцій, викликаних штамами, резистентними до бета-лактамів і аміноглікозидів. У ряді географічних регіонів стійкість ентерококів до ванкоміцину є серйозною клінічною проблемою. Є повідомлення про виділення одиничних штамів ванкоміцинорезистентності ентерококів і вУкаіни. Для виявлення стійкості ентерококів до ванкоміцину доцільно проводити цілеспрямований скринінг.

Препарат є засобом вибору для лікування інфекцій штамами, стійкими до ванкоміцину. Лінезолід також розглядається в якості альтернативи ванкомицину при лікуванні інфекцій, що викликаються штамами, стійкими до бета-лактамів і аміноглікозидів.

інші препарати

Відносно ванкоміцінрезістентних ентеркокков, незважаючи на відсутність переконливих даних, можливо оцінювати активність тетрацикліну, хлорамфеніколу, еритроміцину і рифампіну.

Для штамів ентерококів, виділених при інфекціях сечовивідних шляхів, доцільно досліджувати чутливість до наступних антибіотиків:

  • пеніциліну або ампіциліну;
  • фторхинолонам;
  • тетрацикліну;
  • нітрофуранам;
  • фосфоміцину.

Критерії інтерпретації результатів визначення чутливості Enterococcus spp. (Граничні значення діаметрів зон пригнічення росту і МІК АБП) наведені в таблиці 16.

Скринінг для виявлення високого рівня резистентності до аміноглікозидів у ентерококів

Скринінг можна проводити в агарі або бульйоні.

Живильне середовище

Агар або бульйон на серцево-мозковому екстракті. Живильне середовище готується відповідно до інструкції виробника. Після автоклавування і охолодження до 45 - 50 ° С в середу асептически додають розчини антибіотиків до наступних кінцевих концентрацій:

Приготування мікробної суспензії, інокуляція і інкубація

Мікробну суспензію готують шляхом суспендування ізольовані колонії з 24-годинної культури, вирощеної на неселективних середовищах до концентрації 0,5 за МакФарланда. Для скринінгу на агарі на поверхню середовища наносять 10,0 мкл суспензії. Для скринінгу в бульйоні до середовища вносять інокулюм до кінцевої концентрації 5 × 10 5 КУО / мл. Інкубацію проводять при температурі 35 ° С, для гентаміцину - протягом 24 год, для стрептоміцину - до 48 год.

облік результатів

Досліджуваний штам вважають резистентним при наступних умовах:

  • при скринінгу на агарі - ріст більше 1 колонії;
  • при скринінгу в бульйоні - будь-який видимий зростання.

Контроль якості

  • E.faecalis ATCC 29212 - чутливий.
  • E.faecalis ATCC 51299 - резистентний.

Скринінг для виявлення ванкоміцинорезистентності у ентерококів

Скринінг здійснюється на агарі.

Живильне середовище

Агар на серцево-мозковому екстракті. Живильне середовище готується відповідно до інструкції виробника. Після автоклавування і охолодження до 45 - 50 ° С в середу асептически додають розчин ванкоміцину до кінцевої концентрації 6,0 мг / л.

Приготування мікробної суспензії, інокуляція і інкубація

Мікробну суспензію готують шляхом суспендування ізольовані колонії з 24-годинної культури, вирощеної на неселективних середовищах до концентрації 0,5 за МакФарланда. Для скринінгу на поверхню агару наносять 10,0 мкл суспензії. Інкубацію проводять при температурі 35 ° С протягом 24 год.

облік результатів

Досліджуваний штам вважають резистентним при рості більше 1 колонії на агарі з ванкоміцином.

Контроль якості

  • E.faecalis ATCC 29212 - чутливий.
  • E.faecalis ATCC 51299 - резистентний.

Інформація загального та комерційного характеру

  • Проект технічного завдання на продукцію НІІЕМ імені Пастера. Це допоможе вам!

    Інформація наукового характеру

    • Уреаплазмоз: діагностика, збудники, профілактика - сучасний погляд
    • Лабораторна діагностика гонореї
    • Сучасна лабораторна діагностика туберкульозу легенів
    • Діагностика мікоплазмозу: тепер просто і дешево
    • Антибіотики для лікування уреаплазмоза і мікоплазмозу
    • Хромогенні поживні середовища
    • Лабораторні методи діагностики трихомоніазу (огляд літератури)

    реєстраційні посвідчення

    • Набір дисків для визначення чутливості до протимікробних препаратів - 1 (НД-ПМП-1)
    • Набір реагентів "Діагностикум еритроцитарний коровий антигенний сухий для реакції пасивної гемаглютинації (РПГА)"
    • Набір реагентів для візуального виявлення Mycoplasma hominis (мікоплазми-50)
    • Набір реагентів для візуального виявлення Ureaplasma urealyticum (УРЕАПЛАЗМА-50)

    ФБУН НДІ епідеміології
    і мікробіології імені Пастера
    Відділ нових технологій

    Пошук по сайту