Серологічна оцінка поствакцинального імунітету - класична чума свиней

У Республіці Білорусь обов'язкове вакцинація проти КЧС всього свинопоголів'я. Напряженнocть імунітету у вакцинованих свиней визначають відповідно до "Методичних вказівок по визначенню в РНГА_спеціфіческіх антитіл у свиней, вакцинованих проти чуми", затвердженими 4.08.1989 року Головним управлінням ветеринарії СРСР.

Оцінка напруженості поствакцинального імунітету проводиться за титром AT.

У лабораторію для дослідження напруженості імунітету посилають не менше 10-15 проб сироватки крові від свиней через 20-25 днів після імунізації їх проти чуми.

Для дослідження використовують свіжі сироватки крові, які зберігають при температурі плюс 4 ° С не більше тижня або -20 ° С протягом місяця.

РНГА ставлять з використанням антигенного еритроцитарного диагностикума (3% -ная суспензія еритроцитів барана, сенсибілізованих антигеном вирусвакциной чуми свиней).

Результати РНГА з випробуваними сироватками вважають позитивними при виявленні аглютинації еритроцитарного антигену, починаючи з розведення 1: 4 і вище.

Виявлення специфічних антитіл в титрі 1: 4 і вище у 84% досліджених проб сироватки крові вказує на наявність імунітету у вакцинованих проти КЧ свиней.

Крім РНГА для визначення напруженості імунітету можна використовувати метод ІФА. Суть методу - імунологічний планшет з іммобілізованим рекомбінантним антигеном Е2 вірусу КЧС вносять досліджувану сироватку в різних розведеннях і специфічні моноклональні антитіла до Е2, Кон'югований з пероксидазою хрону. При відсутності в досліджуваній сироватці вирусспецифических антитіл, моноклональних коньюгат вільно взаємодіє з іммобілізованим антигеном і після додавання субстрату і хромогену в лунці з'являється забарвлення. Якщо в досліджуваній сироватці є антитіла до ВКЧС, відбувається їх взаємодія з іммобілізованим антигеном, його часткова або повна блокування, в результаті чого зв'язування коньюгата з антигеном знижується.

Також оцінку поствакцинального імунітету можна проводити за допомогою РДСК, РН. Вакцинацію можна вважати успішною, якщо титр AT в РН флюоресцирующих мікробляшек, через 2-5 місяців після імунізації, складає 1:20 і вище.

Так, титр AT 1:32 і вище свідчить про напружений імунітет. У молодняку ​​до 2-3 місяців імунітет ненапружений і титр AT в РНГА становив 1: 4-1: 8. Через 20 днів після вакцинації поросят вірус-вакциною титр ВНА поступово підвищувався до максимального рівня до 60-го дня, клітинної реакції не відзначено. У трьох групах поросят, щеплених штамами, що викликають хронічну чуму, ВНА не виявлено, клітинну імунну відповідь спостерігали у 4 тварин з 9. Найвищий клітинну імунну відповідь була у поросят, імунізованих інактивованих вірусом. Хоча імунна відповідь у поросят в різних піддослідних групах був неоднаковим, після контрольного зараження вірулентним вірусом вижили всі тварини. У поросят, відібраних в 7-денному віці від імунних свиноматок, пасивний захист може тривати понад 2 місяців. При цьому рівень імунітету буде залежати від часу, що пройшов між вакцинацією свиноматки і опоросом. Так, поросята, народжені від свиноматок, вакцинованих за 10 місяців до пологів, можуть бути вакциновані не раніше віку 5 тижнів. Бустер-вакцинація поросят цієї групи у віці 6 місяців викликала підйом титрів AT і стійкість до вірусу тривалістю до 4 років. У ряді дослідів поросят, народжених від свиноматок, вакцинованих за 1 місяць до злучки, імунізували у віці 5, 7 і 9 тижнів. Незважаючи на те, що перед вакцинацією тварини мали еквівалентні титри пасивно придбаних AT, в подальшому рівень імунітету залежав від часу вакцинації: чим пізніше вакциновані поросята, тим вище титри AT. Найкращі результати отримані в групі поросят, вакцинованих у віці 9 тижнів.

Встановлено, що при титрі ВНА в РН флюоресцирующих бляшок 1: 4 і вище тварини стійкі до внутрішньом'язові зараження епізоотичним штамом в дозі 10 4 ЛД50. при титрі 1: 2 - хворіють і незалежно від результату становлять небезпеку як вірусоносії. Однак у значної кількості вакцинованих тварин ВНА до ВКЧС відсутні. Серед поросят 30-денного віку AT в титрі 1:16 були виявлені лише у 30%, у решти їх виявити не вдалося. У групах дорощування серопозитивних тварин було 16%, у групах відгодівлі через 140-200 днів після вакцинації серопозитивні тварини становили 50%. Вакцинація поросят від невакцинованих свиноматок у віці 9-90 днів викликала у них імунна відповідь, який характеризувався появою в сироватці крові ВНА, а також захистом від прямого зараження вірулентним шт. ВКЧС в польових умовах на 12-18-й день після зараження. Високий рівень AT в сироватці був виявлений у поросят через 30-40 днів після вакцинації. Встановлено, що материнські AT не забезпечують досить надійний захист проти вірулентних штамів ВКЧС. Тривалість поствакцинального імунітету у поросят від нещеплених проти чуми свиноматок триваліше, ніж у поросят від вакцинованих свиноматок. У зв'язку з цим поросят від вакцинованих свиноматок краще вакцинувати в кінці 1-го місяця життя, проте при неблагополучних епізоотичних ситуаціях поросят можна вакцинувати після 2-тижневого віку і через місяць ревакцинувати.

Період напіврозпаду материнських AT у поросят від свиноматок, імунізованих за 9 і 5 місяців або за 85 днів до опоросу, становив 10 днів; AT у поросят володіли високим або середнім авідності до АГ вірусу і надавали помірний ефект на імунну відповідь у поросят після активної імунізації. У поросят від свиноматок, імунізованих за 55 днів до опоросу, період напіврозпаду молозивних AT становив 6 днів; AT володіли слабкою активністю і значною мірою придушували освіту AT після активної імунізації у поросят.