Прокальцитонін і кальцитонін

Опис і використання прокальцитоніну

У деяких випадках підвищення концентрації ПКТ може бути викликано факторами, не пов'язаними з утворенням сепсису і інфекції. Хірургічне втручання, політравми, тепловий шок, опіки і кардіогенний шок також можуть привести до збільшення рівня вмісту ПКТ. Механізм підвищення концентрації ПКТ в зазначених випадках на сьогоднішній день чітко не встановлено. Численні проведені дослідження вказують на важливість моніторингу змін концентрації ПКТ після кардіохірургічного втручання або трансплантації серця в цілях визначення випадків гострого відторгнення трансплантата під впливом бактеріальних або грибкових інфекцій.

Таким чином, ПКТ має високу діагностичну цінність, а доцільність визначення його концентрації в крові пацієнтів з використанням специфічних моноклональних антитіл є досить перспективною і абсолютно очевидною.

Будова прокальцитоніну, кальцитоніну і катакальціна

Як правило, ПКТ виробляється в С-клітинах щитовидної залози. В результаті декількох послідовних розщеплення утворюються три молекули: N-кінцевий фрагмент (N-кінцевий ПКТ, 57 амінокислотних залишків), кальцитонін (32 амінокислотних залишку) і катакальцін (21 амінокислотний залишок) (рис. 1).

Мал. 1. Амінокислотна послідовність прокальцитоніну. 1 - сигнальний пептид (25 а.к.о.); 2 - N-кінцевий фрагмент (N-термінальний ПКТ, 57 а.к.о.); 3 - кальцитонін (32 а.к.о.); 4 - катакальцін (21 а.к.о.).

N-кінцевий фрагмент прокальцитоніну (PCT) являє собою пептид, що містить 57 амінокислотних залишків. Моноклональні антитіла, специфічні до N-кінцевого фрагменту ПКТ, рекомендуються до застосування для імунологічного виявлення ПКТ в поєднанні з антитілами, специфічними до кальцитоніну або катакальціну. Специфічні до N-кінцевого фрагменту ПКТ антитіла можуть з високою ефективністю застосовуватися в якості захоплюючих антитіл при проведенні досліджень сендвіч-методом.

Кальцитонін - продукт ферментативного розщеплення прокальцитоніну, являє собою пептид, що складається з 32 амінокислотних залишків, молекулярна маса якого становить близько 3,4 кДа, теоретична pI 6,72. Кальцитонін є гормоном, які беруть участь у метаболізмі кальцію і фосфору.

Катакальцін є С-кінцеву частину молекули прокальцитоніну, що складається з 21 амінокислотного залишку, молекулярна маса якої становить близько 2,4 кДа, теоретична pI5,26.Фізіологіческая роль катакальціна невідома.

Моноклональні антитіла до ПРОКАЛЬЦИТОНІН компанії Біалекса

Компанія Біалекса пропонує моноклональні антитіла, що володіють високою специфічністю до різних епітопів молекули кальцитонина: до N-кінцевого фрагменту ПКТ, кальцитоніну і катакальціну. Пари моноклональних антитіл, специфічних до різних частин молекули ПКТ, можуть використовуватися для виявлення необроблених або частково оброблених молекул ПКТ. Специфічність антитіл показана на рис. 2.

Мал. 2. епітопной специфічність моноклональних антитіл компанії Біалекса до ПРОКАЛЬЦИТОНІН.

Найбільш високі показники чутливості при проведенні імунологічних досліджень для виявлення ПКТ в зразках крові пацієнта були досягнуті з використанням наступної пари моноклональних антитіл компанії Біалекса: CB5 (кальцитонін-специфічне, підкладка) і 4PC2 (N-кінцевий ПКТ, детекторне антитіло). Проте, з метою виявлення ПКТ під час проведення імунологічних досліджень сендвіч-методом також можуть використовуватися деякі інші комбінації моноклональних антитіл (рис.3).

Мал. 3. Пари антитіл, рекомендовані для визначення прокальцитоніну в сендвіч ІФА

Антитіла пройшли випробування, спрямовані на визначення їх здатності до виявлення ПКТ за допомогою методу Вестерн-блот. Все моноклональні антитіла здатні виявляти ПКТ під час проведення блоттинга після ДСН-електрофорезу в відновлюють умовах.

Антитіла до катакальціну можуть використовуватися для специфічного і сенситивного виявлення ПКТ в крові людини. Використання антитіл до катакальціну рекомендується головним чином як захоплюючих антитіл при проведенні ПКТ імунологічних досліджень.