Ембріотоксична, гонадотоксичного, тератогенну і мутагенну
Окремі токсичні речовини при надходженні в організм тварин разом з кормом або в результаті обробок можуть мати негативний вплив на репродуктивну функцію тварин, викликаючи ембріотоксичну, тератогенну, гонадотоксичного дію. З цієї причини токсичні речовини, які можуть надходити в організм тварин з кормом постійно або протягом певного періоду, повинні піддаватися дослідженню на ембріотоксичність, тератогенність і гонадотоксичности. Також доцільно досліджувати на наявність цих дій деякі лікарські препарати і премікси, якщо їх використовують багаторазово.
Ембріотоксичну дію. Це здатність досліджуваного речовини негативно діяти на ембріони, що розвиваються. У медичній токсикології ембріотоксичну дію вивчають на самках білих щурів, яким протягом всієї вагітності вводять всередину через зонд або дають з кормом препарат. На 17-19-й день вагітності, початок якої встановлюють за результатами дослідження вагінальних мазків, щурів вбивають, підраховують число плодовместилища, жовтих тіл в яєчниках, живих і мертвих плодів. Порівнюючи результати цих досліджень у дослідній і контрольній групах, встановлюють ступінь Ембріотоксична активності препарату. Частина вагітних щурів з досвідчених груп залишають для пологів, при цьому враховують тривалість вагітності, число плодів, їх масу, довжину тулуба новонароджених щурят, їх розвиток (збільшення довжини і маси за певний термін, час відкриття очей, покриття шерстю, початку самостійного пересування по клітці і поїдання корму). Крім того, враховують виживання щурят, розподіл їх по підлозі. При цьому відзначають: виборчу ембріотоксичність - ефект проявляється в дозах, що не токсичних для материнського організму; загальну ембріотоксичність - проявляється одночасно з розвитком інтоксикації організму матері; відсутність ембріотоксичності - ефект не відзначається при ознаках інтоксикації материнського організму (Медведь, 1968).
Будь-яких методичних підходів до визначення ембріотоксичних властивостей препаратів ветеринарного призначення немає.
I la перших етапах, мабуть, доцільно в якості моделі використовувати також білих щурів, так як досліди на сільськогосподарських тварин скрутні через тривалі термінів вагітності і порівняно невеликого числа особин в посліді (за винятком свиней). У тому випадку, якщо буде встановлено, що досліджувані сполуки мають загальної або виборчої ембріотоксичність, ставлять досліди на тваринах, і перш за все на свинях.
Препарати в залежності від їх цільового призначення і способу застосування доцільно давати з кормом, вводити внутрішньом'язово або наносити накожно.
Тератогенну дію. Це така дія, при якому порушується формування плоду в період його ембріонального розвитку. Виявляється воно у вигляді каліцтв. Тератологія як наука отримала розвиток після випадків з талідомідом - лікарським препаратом, широко застосовувався вагітними жінками в Західній Європі в якості снодійного і седативного засобу. В результаті було зафіксовано народження дітей з вродженими вадами розвитку.
У медичній токсикології тератогенну дію пестицидів визначають на білих щурах. Для цього препарат тваринам вводять всередину через 1 день протягом всієї вагітності. Частина тварин дослідних груп вбивають на 17-20-й день вагітності, частину залишають до пологів. При розтині убитих щурів визначають середнє число жовтих тіл на одну самку, нормально і ненормально, що розвиваються зародків, а також резорбтірованних плодів.
При пологах враховують число народили самок, народившегося потомства, в тому числі мертвонароджених, встановлюють середню масу потомства, довжину тулуба, кінцівок і інші морфологічні особливості (Ведмідь, 1969).
Тератогенну дію препаратів на сільськогосподарських тварин не вивчають.
Гонадотоксичного дію. При вивченні гонадотоксичного дії встановлюють вплив досліджуваного препарату окремо на статеву сферу самок і самців. Досліди проводять на білих щурах. На самках досліджують дію препарату на астральний цикл і овогенез, на самцях - на рухливість, морфологію, різі-стентності сперміїв і сперматогенез.
Естральний цикл визначають, досліджуючи мазки з піхви. Для цього очної піпеткою вводять в піхву підігрітий фізіологічний розчин (2-3 краплі), кілька разів пропускають його через піпетку, а потім вводять назад в піхву. Після цієї процедури за допомогою предметних стекол готують мазки з піхви, фіксують їх над полум'ям і фарбують протягом 1 хв 1% -ним водним розчином метиленової сині.
Мазок переглядають під мікроскопом при малому збільшенні.
Розрізняють такі основні стадії естрального циклу:
фаза проеструса (предтечкі) триває кілька годин і характеризується переважанням в мазках епітеліальних клітин;
фаза еструса (тічки) триває 1-2 дні. У цій стадії в основному присутні ороговілі полігональні клітини (лусочки);
метеструса (послетечка) має тривалість 1-2 дні і характеризується присутністю поряд з лусочками епітеліальних клітин і лейкоцитів;
фаза діеструса (фаза спокою між тічки) характерна присутністю лейкоцитів і слизу. Тривалість цієї фази дорівнює половині всього циклу.
Зміна тривалості стадій естрального циклу або характеру клітин на різних його стадіях є показником дії досліджуваного речовини.
Для вивчення дії хімічної речовини на овогенез готують гістологічні зрізи з яєчників і визначають стадії розвитку фолікулів в дослідних і контрольних групах тварин.
При вивченні гонадотоксичного дії препаратів на самців визначають співвідношення рухомих і нерухомих форм сперміїв, наявність патологічних форм, їх резистентність і фази сперматогенезу (Ведмідь, 1969).
Мутагенну дію. Деякі хімічні речовини порушують передачу генетичної інформації, внаслідок чого можлива поява мутантів - особин з ознаками, не властивими даному виду. Тому вивчення мутагенних властивостей пестицидів та інших хімічних речовин - один з необхідних етапів токсикологічного дослідження. У ряді країн з цією метою використовується скринінговий тест - тест Еймса. Як тест-організму використовуються окремі штами бактерій групи сальмонел, високочутливих до хімічних мутантів. При наявності потенційної мутагенності у досліджуваного хімічної речовини відбувається розщеплення генів і різко зростає кількість колоній на щільному живильному середовищі. Однак мутагенность хімічної речовини, яку було виявлено за допомогою цього тесту, не може бути визнана абсолютною, так як вищі тварини мають потужні захисні системи, які захищають клітини, відповідальні за передачу генетичної інформації, від впливу зовнішніх факторів, в тому числі і хімічних речовин. У багатьох випадках під дією ферментних систем хімічна речовина може бути детоксіціровано, перш ніж воно досягне «мішені».