Виготовлення вологих препаратів

ВИГОТОВЛЕННЯ ВОЛОГИХ ПРЕПАРАТІВ

Найбільш поширений метод збереження органів і окремих тканин (частин) трупа тварини у вологому середовищі (рідини), як більш надійний для збереження природного забарвлення.

Виготовлення вологих патологоанатомічних препаратів складається з ряду етапів: відбір матеріалу і підготовка його до фіксації; фіксація; відновлення кольору; консервування (просочування гліцеринової сумішшю); монтування препарату.

Для фіксації, відновлення кольору і консервування патологоанатомічного матеріалу запропоновано кілька прописів розчинів. З них найбільше практичне значення мають наступні.

Формалін є 40% -ний водний розчин формальдегіду (СН20). Це безбарвна або злегка жовтувата рідина з різким запахом. Добре розчиняється у воді. Має сильну бактерицидну дію. Вперше в патологоанатомічної практиці застосований в 1893 р з тих пір завдяки доступності, дешевизні і здатності надійно охороняти органи і тканини від гниття став одним з найбільш уживаних фіксаторів.

Розчини формаліну легко випаровуються, і його пари викликають подразнення слизових оболонці, що викликає сльозотечу, кашель, чхання (небезпечний для верхніх дихальних шляхів). При роботі (з патматеріалом, фіксованим у формаліні) без рукавичок відбувається дублення і зморщування шкіри рук. Дія його на тканини викликає незворотний процес. Зберігання формаліну на світлі, а також в холодному приміщенні призводить до полімеризації його, утворюється параформальдегід (параформ), який випадає на дно посудини (пляшки) у вигляді щільного білого осаду або пластівців, які плавають у рідині і надають їй колір молока.

Для розчинення осаду (або відновлення) формалін нагрівають до 80-85 ° С з лугами. На 100 мл такого формаліну (з осадом) беруть 130 мл води і 20 мл нормального розчину їдкого калі (56 г КОН на 1 л води). В результаті формалін стає прозорим. Іноді для просвітлення формаліну буває достатньо лише підігріти його. Підігрівають формалін в витяжній шафі або на відкритому повітрі.

Дія формаліну на тканини залежить від концентрації його і тривалості фіксації. Якщо розчини концентровані, швидко утворюється поверхневий шар коагулированного білка і фіксація сповільнюється, слабкі розчини легше проникають в тканину, але діють повільніше.

Кращими фіксують властивостями володіє 10% -ний розчин нейтрального формаліну.

Послідовність виготовлення патологоанатомічних препаратів. Відбір матеріалу і підготовка його до фіксації. Для приготування препарату беруть такі ділянки органів і тканин, які містять не тільки уражені, але і здорові тканини (для порівняння). Матеріал для приготування препаратів беруть незабаром після загибелі або забою тварини, тому що чим довше лежить труп, тим гірше зберігається картина патологічного процесу (особливо швидко змінюється колір тканин), тим важче відновити природний колір тканин.

Спочатку проводять попередню обробку. Вона полягає в тому, щоб видалити всі непотрібні для демонстрації того чи іншого процесу тканини. Різні забруднення, обривки тканин, згустки крові видаляють до фіксації, оскільки після неї надати відповідну форму препарату або зняти забруднення і кров практично неможливо, не порушуючи його зовнішнього вигляду. Іноді препарат на кілька годин (4-8) поміщають в фіксуючу рідину, а потім проводять його відповідну обробку: знімають забруднення, зрізають обривки тканин, видаляють жир і ін.

Товщина препарату не повинна перевищувати 3-4 см, так як фіксує рідина повільно проникає в глиб тканин. Якщо препарати з якої-небудь причини не можна зробити необхідної товщини, то до занурення їх в рідину роблять (гострим ножем з протилежного для показу боку) надрізи, в які кладуть гигроскопическую вату, змочену фіксує рідиною. Фіксуючу рідину в товщу препарату можна вводити шприцом, проколюючи його в багатьох місцях. Якщо фіксують цілком орган або труп дрібного тваринного, фіксуючу рідину вводять у великі кровоносні судини або інші природні канали під тиском. Крім того, видаляють внутрішні органи через розріз черевної стінки; останню акуратно зашивають (або кишечник видаляють через тазову порожнину і пряму кишку).

Тканини, що володіють здатністю швидко зморщуватися, перед фіксацією розтягують на будь-якому твердому предметі (на корковій пластинці, картоні, тонкої дошці) і разом з ним поміщають в фіксуючу рідину. Відрізки кишечника (слизовою оболонкою вгору) також фіксують, зміцнивши на шматочку картону або коркової платівці. У тих випадках, коли потрібно зберегти цілісність і товщину полостного органу, фіксуючу рідину наливають в його порожнину, а потім заповнюють гигроскопической ватою або вивертають (якщо є показання) слизовою оболонкою назовні, а порожнину заповнюють гигроскопической ватою або іншим гігроскопічним матеріалом (бавовняної матерією), надавши йому відповідний зовнішній вигляд. Щільні трубчасті органи (трахея, бронхи, гортань) фіксують в розкритому стані. Для цього вставляють розпірки (скляні трубочки або дерев'яні палички) в місцях їх розрізу або роз'єднання. Розпірки вставляють так, щоб вони не затуляли змінених ділянок. Під серцеві клапани (мітральний, тристулковий і півмісяцеві в аорті і легеневої артерії) кладуть шматочки гігроскопічної вати, змоченої фіксує рідиною.

Фіксування. Підготовлений препарат фіксують. Для цього на дно посуду (уникати металевої!), В якій буде фіксуватися препарат, кладуть шар гігроскопічної вати, змоченої фіксує рідиною. На неї поміщають препарат, надають йому відповідну форму і заливають рідиною. Кращими вважають рідини Кайзерлинга і Мельникова-Разведенкова (розчин I). Якщо одночасно фіксують кілька препаратів, то кожен з них акуратно прокладають ватою (також змоченою фіксує рідиною). Це роблять для того, щоб препарати не деформувалися.

Обсяг фіксує рідини повинен в кілька разів перевищувати обсяг фіксованої матеріалу. Тривалість фіксації залежить від розмірів органу або тканини і визначається дослідним шляхом. Стінки порожнинних органів (шлунок, кишечник, сечовий міхур та ін.) Фіксують 1-2 діб, паренхіматозні органи (серце, селезінка, нирки, легені та ін.) - 1-2 тижні і довше.

Критерієм того, що матеріал профільованого, є його ущільнення, рівномірне фарбування з поверхні і на розрізі в брудно-сірий або бурий колір. Перетримувати препарати в фіксує рідини не рекомендується, так як формалін руйнує гемоглобін і здатність органу відновлювати природне забарвлення втрачається.

Відновлення кольору препарату. Профільований матеріал переносять в етиловий спирт концентрацією не нижче 80-90% (спирт-сирець непридатний). Невеликі органи або тканини (або шматочки великих органів) повністю занурюють в спирт, великі органи, щоб не витрачати багато спирту, обкладають ватою, рясно змоченою спиртом. Посуд, в якій відновлюють препарат, щільно закривають.

У 1895 р Н. Ф. Мельников-Разведенков встановив, що метгемоглобін, що утворюється при фіксації препарату і надає органу або тканини брудно-сірий колір, перекладається спиртом в стійкий катгемоглобін (нейтральний гематин), що має колір оксигемоглобина і відновлює природну забарвлення органу або тканини .

Іноді природний колір відновлюється дуже швидко, протягом декількох хвилин. Однак, щоб спирт проник глибше в тканини, препарат витримують в спирті протягом 12 год. Можна спочатку занурити препарат в спирт, вже був у вжитку, а потім на 1-2 ч в свіжий. Якщо препарат досить повно відновив природний колір, процес потрібно призупинити. При перетримці в спирті препарат знебарвлюється.

У літературі є прописи, в яких спирт не є необхідною складовою частиною для відновлення кольору. Природне забарвлення органу або тканини зберігається, якщо до розчину I додати хлоралгидрат. Приклад такої прописи:

Однак ця суміш (пропис) менш ефективна в порівнянні з прописами, що містять спирт, і використовується значно рідше.

Консервування (просочування препаратів гліцеринової сумішшю). Після відновлення кольору органи або тканини переносять в розчин III для консервування і тривалого зберігання.

Висновок препарату в скляну банку (підготовка посуду і монтаж вологих препаратів). Для зберігання вологих патологоанатомічних препаратів частіше використовують прямокутні скляні банки. Можна вживати і циліндричні судини, рідко - банки домашнього вжитку (консервна посуд). Посуд, в якій роблять препарати для музею, повинна бути прозорою, не перекручувати колір і форму препарату і герметично закриватися кришкою. Банки для зберігання препаратів готують заздалегідь. Їх ретельно миють за допомогою щітки водою з милом. Підбирають до них і також ретельно миють скляні кришки (їх вирізують зі скла трохи більше периметра отвори банки). Перед приклеюванням кришки краю банки знежирюють спиртом або авіаційним бензином і обмазують менделєєвської замазкою (краще занурити краю банки в розплавлену мастику). Потім в банку наливають небагато гліцеринової суміші (розчин III) і опускають змонтований (на скляній пластинці або без неї) препарат. Скляну пластинку зазвичай вирізають по ширині банки, а препарат до неї прикріплюють білими нитками впритул. Заливають препарат сумішшю, не доводячи до країв на 3-4 см. Туди ж опускають шматок ватману або іншої білого паперу, на якій тушшю або графітним олівцем написаний код препарату. У книзі записів під цим номером-шифром позначають всі дані про препарат: звідки він надійшов, коли, вид тварини, ніж боліло і ін. Потім нагрівають на полум'ї пальника ^ спиртової або газової) кришку і кладуть її на ребра банки, на якій попередньо була нанесена Менделеєвська замазка. Остання плавиться, і кришка щільно прилягає до банку. Можна кришку не нагрівати, а поставити на неї гарячий важкий предмет (наприклад, праска). Коли кришка охолоне і замазка затвердіє, краю кришки ще раз обмазують менделєєвської замазкою і покривають чорною емаллю або чорним лаком. У верхньому кутку банки зазвичай наклеюють етикетку з зазначенням органу та патологоанатомічного процесу. До складу менделєєвської замазки входять:

Готують її обратом. Спочатку в водяній бані розплавляють бджолиний віск, потім додають каніфоль, масу перемішують, додають мумію (охру), розмішують і додають масло. Суміш варять до припинення піноутворення (приблизно 2 ч).

Музейну посуд набувають по лінії Зооветснаба або в зоомагазинах. Якщо спеціального посуду немає, її можна приготувати з органічного скла. Техніка виготовлення описана у відповідних посібниках.