Робота з камерою Горяєва - тести і завдання з клінічної лабораторної діагностики
Камера Горяєва - оптичний пристрій для підрахунку клітин або інших порівнянних з ними часток в заданому обсязі рідини. Складається з товстого предметного скла, що має прямокутне поглиблення (камеру) з нанесеною мікроскопічної сіткою і тонкого покривного скла. Камера розроблена професором Казанського університету Горяєвим Н.К. Завдяки збільшеному об'єму сітки відрізняється більшою точністю підрахунку, в порівнянні з іншими камерами (Тома, Цейс, Тюрка, Бюркера).
Технічні характеристики камери Горяєва
Розміри малого квадрата камери Горяєва 0,05 × 0,05 мм
Розміри великого квадрата камери Горяєва 0,2 × 0,2 мм
Глибина камери 0,1 мм
Обсяг рідини під 1 малим квадратом 0,00025 мм3 (мкл) = 1/4000 мм3 (мкл)
Обсяг рідини під 1 великим квадратом 0,004 мм3 (мкл) = 1/250 мм 3 (мкл)
Обсяг камери Горяєва 0,9 мм 3 (мкл)
Опис сітки камери Горяєва
Сітка камери Горяєва складається з 225 великих квадратів, з яких 25 розділені на 16 малих квадратів.
Рис 1. Сітка камери Горяєва
Рис 2. Великий (1) і малий (2) квадрати сітки камери Горяєва
Рис 3. 225 великих квадратів сітки камери Горяєва
Рис 4. 100 великих квадратів сітки камери Горяєва
Рис 5. Великий квадрат камери Горяєва розділений на 16 малих квадратів.
Обслуговування камери Горяєва
Між роботою камера повинна зберігатися в сухому місці. Після роботи камера дезінфікується зануренням на 30 хвилин в 70% розчин етилового спирту, або на 60 хвилин в 4% розчин формаліну, після чого камера промивається дистильованою водою і протирається м'якою серветкою.
Правило підрахунку клітин в квадраті (правило Єгорова)
В квадраті вважаються клітини, що лежать в його душі, а також стосуються лівої і верхньої меж. Клітини, що стосуються правої і нижньої меж при підрахунку не враховуються.
Методика підрахунку лейкоцитів у камері Горяєва
Розвести зразок досліджуваної крові в 20 разів 3-5% розчином оцтової кислоти з метиленовим синім (наприклад, 20 мкл крові і 380 мкл розчину оцтової к-ти). Камеру і покривне скло насухо протерти марлею. Не допускається використання для протирання ватних тампонів через що залишаються на склі волокон. Акуратно притертися покривне скло до камери, злегка натискаючи на нього до появи кольорових кілець Ньютона. Заповнити камеру розлученою кров'ю і витримати 1 хвилину для припинення руху клітин. При малому збільшенні (окуляр × 10, об'єктив × 8) порахувати лейкоцити в 100 великих квадратах. Розрахунок числа лейкоцитів здійснюють, виходячи з розведення крові (20) і числа великих квадратів (100), за формулою: X = (a × 250 × 20) / 100, де Х - кількість лейкоцитів в 1 мкл крові; а - число лейкоцитів, порахованих в 100 великих квадратах камери Горяєва. Практично, після скорочень у формулі, кількість порахованих лейкоцитів множать на 50.
Методика підрахунку еритроцитів в камері Горяєва
Розвести зразок досліджуваної крові в 200 разів в 0,9% розчині NaCl або розчині Гайема (береться 20 мкл крові і 4 мл розчину). Камеру і покривне скло насухо протерти марлею. Не допускається використання для протирання ватних тампонів через що залишаються на склі волокон. Акуратно притертися покривне скло до камери, злегка натискаючи на нього до появи кольорових кілець Ньютона. Заповнити камеру розлученою кров'ю і витримати 1 хвилину для припинення руху клітин. При малому збільшенні (окуляр × 10, об'єктив × 8) порахувати еритроцити в 5 великих квадратах розділених на 16 малих (тобто в 80 малих квадратах). Рекомендується вважати клітини в квадратах, розташованих по діагоналі. Розрахунок числа еритроцитів здійснюють, виходячи з розведення крові (200) і числа малих квадратів (80), за формулою: X = (a × 4000 × 200) / 80, де Х - кількість еритроцитів в 1 мкл крові; а - кількість еритроцитів, порахованих в 80 малих квадратах камери Горяєва. Практично, після скорочень у формулі, кількість порахованих еритроцитів множать на 10 000.