Побудова калібрувального графіка
Попередньо необхідно підготувати посуд - мірні колби, пробірки, піпетки, реактиви і розчини.
Малюнок 14 - Графік визначення нітритів
Для побудови калібрувального графіка готують серію стандартних розчинів, що охоплюють діапазон вимірюваних концентрацій досліджуваної речовини відповідно до методики.
Калібрувальний графік будують по 5-6 серій шкал; кількість концентрацій в кожній шкалі повинна бути не менше 5. Різко відрізняються значення оптичної щільності не враховують. З інших розраховують середнє арифметичне значення для кожної концентрації і будують графік залежності оптичної щільності від концентрації речовини (рисунок 14).
Приблизний розмір графіка 20-25x30 см; пряма повинна проходити через початок координат під кутом приблизно 45 °. В ідеальному випадку всі крапки розташовуються на прямій, зазвичай частина точок розташовується на прямій, частина вище і нижче її, точки як би чергуються.
На графіку повинні бути вказані умови фотометрірованія: номер світлофільтру або довжини хвилі (нм); розмір кювети (мм); час фотометрірованія. Крім того, повинна бути вказана дата побудови калібрувального графіка. Калібрувальний графік необхідно періодично перевіряти по 2-3 концентрацій.
Найбільш поширеними приладами є фотоелектроколориметр ФЕК-56М, колориметр фотоелектричний однопроменевий КФВ, колориметр фотоелектричний концентраційний КФК-2 (рисунок 15), КФК-2МП з мікропроцесорної системою «Електроніка» і спектрофотометр СФ-46 (таблиця 2).
Таблиця 2 - Технічні дані фотометричних приладів
Спектральний діапазон, нм
Надійність результатів вимірювань при роботі на Фотоелектроколориметр і спектрофотометрах забезпечується, правильною установкою і експлуатацією приладів. Тому приступати до вимірів можна тільки після ретельного ознайомлення з описом пристрою приладу і правил його експлуатації.
Підготовка до роботи. Прилад включають в мережу за 15 хв до початку вимірювань. Під час прогріву кюветноє відділення повинно бути відкрито (при цьому шторка перед фотоприймачами перекриває світловий пучок). Потім встановлюють необхідний кольоровий світлофільтр і встановлюють ручку «чутливість» в положення «1» (при вимірюванні зі світлофільтрами 315, 364, 400, 440, 490, 540 нм, позначеними на лицьовій панелі приладу цифрами чорного кольору, ручку «чутливість» встановлюють в положення «1», «2», «3», позначених на лицьовій панелі також цифрами чорного кольору). При вимірюванні зі світлофільтрами 590, 670, 750, 870, 980 нм, позначеними на лицьовій панелі приладу цифрами червоного кольору, ручку «чутливість» встановлюють в одне з положень «1», «2», «3», позначених на лицьовій стороні панелі також цифрами червоного кольору. Ручку «установка 100 грубо» переводять в крайнє ліве положення. Перед вимірами і при перемиканні фотоприймачів необхідно перевірити установку стрілки приладу на «О» за шкалою коефіцієнтів пропускання «Т» при відкритому кюветном відділенні. При переміщенні стрілки від нульового положення її підводять до нуля за допомогою потенціометра «нуль», виведеного під шліц.
Визначення оптичної щільності. У кюветноє відділення встановлюють кювети з розчинником (або контрольним розчином) і досліджуваними розчинами. Спочатку світловий пучок пропускають через кювету з розчинником (або контрольним розчином). Закривають кришку кюветного відділення. Ручками «чутливість» і «установка 100 грубо» і «точно» встановлюють відлік 100 за шкалою приладу. Потім поворотом ручки замінюють кювету з розчинником (або контрольним розчином) на кювету з досліджуваним розчином. Знімають показання за шкалою приладу в одиницях оптичної щільності. Вимірювання проводять 3-5 разів, і остаточне значення оптичної щільності визначають як середнє арифметичне.