Контроль пирогенности - студопедія

Пірогенні ВЕЩЕСТВА. МЕТОДИ ДЕПІРОГЕНІЗАЦІІ

Пірогенні речовини (від слів "бенкет" - вогонь, "Гена" - виробляти) вперше були виділені з загниваючого м'яса Бердон-Сандерсеном в 1875 р Пірогенні речовини утворюють грамнегативнібактерії. Встановлено, що пирогенную реакцію викликають живі і мертві мікробні клітини, а також продукти їх життєдіяльності. При попаданні в кров пірогенні речовини викликають у людини і тварин лихоманку, озноб, підвищення температури тіла, падіння артеріального тиску, ціаноз, блювання, пронос, нейропенія, лейкоцитоз.

Пірогенна активність грампозитивнихмікроорганізмів в 10000 - 100000 разів слабкіше.

За хімічним складом пірогенні речовини - це високомолекулярні сполуки ліпополісахарідной природи з молекулярної масою до 8000000 і розміром частинок від 50 нм до 1 мкм. Молекула пирога складається з 3 частин:

1) загальний полісахарид, він однаковий для багатьох грамнегативних бактерій;

2) іммуноспеціфіческая полисахаридная ланцюг, характерна для кожного виду мікробів;

3) липид А (токсична частина) - саме він викликає пирогенную реакцію організму. Являє собою дисахарид глюкозамін, до якого амідними і ефірними зв'язками приєднуються жирні кислоти.

Пірогени є термостабільними речовинами. Вони не руйнуються при температурі стерилізації 120 ° С і 132 ° С. Тому при приготуванні лікарських форм для ін'єкцій дуже важливо суворе дотримання асептики. Крім того, застосовують такі методи депірогенізаціі:

1) хімічні - обробка матеріалів 0,5-1% розчином калію перманганату, подкисленном сірчаною кислотою; або нагрівання протягом 1 години при t = 100 ° С в розчині пероксиду водню;

2) адсорбційні - поглинання пирогенов активованим вугіллям, целюлозою;

3) термічний - прожарювання при t 180 ° С і вище;

4) механічні - відділення пирогенов мембранним фільтруванням.

Випробування на пірогенність води і розчинів для ін'єкцій проводять відповідно до ГФ РБ Т 1, с.268. Щокварталу випробування на пірогенність ін'єкційних розчинів і води для ін'єкцій здійснюють в бактеріологічних лабораторіях біологічним методом. Метод заснований на вимірюванні температури тіла кроликів після введення розчинів досліджуваних речовин.

Випробування проводять на здорових дорослих кроликах обох статей масою не менше 1,5 кг. бажано від 2,0 до 3,5 кг. Кожен кролик повинен міститися індивідуально в спокійному приміщенні при однорідної підходящої температурі. Протягом тижня, що передує досвіду, кролики не повинні втрачати в масі. Температура тіла кроликів повинна бути в межах 38,5-39,5 0 С (вимірюється ректально, використовують термометр або електричний пристрій). При збиранні клітин і зважуванні тварин оберігають від збудження (шум і різкі рухи). Випробовувані лікарські засоби, вода для ін'єкцій, шприци та голки повинні бути стерильними і апірогенної. Попереднє випробування на тваринах проводять відповідно до ГФ РБ. При випробуванні на пірогенність води для ін'єкцій з неї готують ізотонічний розчин натрію хлориду. Розчини підігрівають до температури 37 0 С і повільно вводять в крайню вену вуха кожного з кроликів протягом не більше 2 хвилин, якщо інше не передбачено в приватній статті. Визначення вихідної і максимальної температури проводять відповідно до ГФ РБ. При визначенні вихідної температури кролики, у яких два послідовних значення температури варіюються в межах, що перевищують 0,2 о С, вилучаються з випробування.

Воду для ін'єкцій або розчин лікарського засобу вважають непірогеннимі, якщо сума підвищень температури у трьох кроликів менше або дорівнює 1,4 про С. Якщо ця сума перевищує 2,2 о С, то воду для ін'єкцій або розчин лікарського засобу вважають пірогенним. У разі, коли сума підвищення температури у 3 кроликів знаходиться в межах від 1,5 до 2,2 о С, випробування повторюють додатково на 5 кроликах. В цьому випадку воду для ін'єкцій або розчин лікарського засобу вважають непірогеннимі, якщо сума підвищень температури у всіх 8 кроликів не перевищує 3,7 0 С. Якщо ж ця сума дорівнює 3,8 0 С або більше, воду для ін'єкцій або розчин лікарського засобу вважають пірогенним.