Живильні середовища - студопедія

Оцінка зростання бактерій

Кількісну оцінку зростання зазвичай проводять в рідких середовищах, де ростуть бактерії утворюють гомогенну суспензію. Збільшення кількості клітин встановлюють, визначаючи концентрацію бактерій в 1 мл, або визначають збільшення клітинної маси в вагових одиницях, віднесених до одиниці об'єму.

Підрахунок мікроорганізмів можна проводити безпосередньо під мікроскопом з використанням різних рахункових камер (наприклад, Петрова-Хаузера або Горяєва).

Крім складу поживних середовищ, на яких розвиваються бактерії, велике значення мають умови культивування та, перш за все, температура, аерація і концентрація водневих іонів в середовищі.

Живильні середовища є основою бактеріологічних досліджень. Вони служать для виділення з досліджуваного матеріалу чистих культур бактерій, для вивчення їх властивостей. На поживних середовищах створюються оптимальні умови для розмноження мікроорганізмів. До складу середовищ повинні входити речовини, необхідні для побудови всіх компонентів цитоплазми, тобто всі джерела зростання живого організму. Сюди, в першу чергу, відносяться джерела азоту, вуглецю, водню і кисню.

Джерело водню і кисню в поживних середовищах - вода.

Джерелом азоту служать органічні сполуки, які отримують з м'яса, риби, плаценти, молока, яєць, крові. В результаті гідролізу панкреатином або трипсином з цих продуктів виходять т.зв. гідролізати, що містять велику кількість амінокислот і пептонов, які добре засвоюються більшістю мікроорганізмів. Нативний білок засвоюють тільки деякі мікроорганізми, які мають екзопротеази. Гідролізати є основою для приготування середовищ для багатьох мікроорганізмів.

Джерелом вуглецю для патогенних мікробів є, головним чином, різні вуглеводи: моно і дисахара, багатоатомні спирти, органічні кислоти і їх солі.

Крім органогенов, бактеріям необхідні неорганічні сполуки, що містять фосфор, калій, сірку, натрій, магній, залізо, а також мікроелементи: кобальт, йод, марганець, бор, цинк, молібден, мідь і ін.

Потреба мікроорганізмів в неорганічних з'єднаннях задовольняється додатком до живильному середовищі солей КН2 РO4; К2 НРO4 і ін. Мікроелементи, що виконують роль каталізаторів хімічних процесів, необхідні в мізерно малих кількостях і надходять в живильне середовище з пептоном, неорганічними солями і водою. Поряд з перерахованими органічними елементами, багато мікроорганізми потребують факторах росту. тобто в речовинах, які вони самі не можуть синтезувати. Фактори зростання необхідно додавати в поживні середовища в готовому вигляді. До факторів росту відносяться різні вітаміни, джерелом яких в поживних середовищах є додані до живильному середовищі продукти рослинного і тваринного походження, що містять в своєму складі нікотинову, пантотенову, парабензойную кислоти, вітаміни А, В, С та ін.

Живильні речовини мікробами можутьзасвоюватися тільки при певній реакції середовища, тому що проникність оболонок мікробних клітин змінюється в залежності від рН середовища.

Вимоги, що пред'являються до живильних середовищ.

1. Поживні середовища повинні містити необхідні для харчування мікробів живильні речовини.

2. Мати реакцію рН, оптимальну для вирощуваного виду мікроба. -

3. Живильні середовища повинні мати достатню вологість і в'язкість, тому що мікроби харчуються за законами дифузії і осмосу.

4. Володіти Ізотонічність і мати певний окислювально-відновний потенціал (Гн2).

5. Живильні середовища повинні бути стерильними, забезпечуючи тим самим можливість вирощування чистих культур.

Потреба в поживних речовинах і фізичних умовах у різних видів мікробів неоднакова, і цим виключається можливість створення універсальної живильного середовища.

За консистенцією розрізняють щільні і рідкі поживні середовища. Щільні готують на основі рідких за допомогою додавання до них клейових речовин: агар-агар або желатину. Агар-агар (по-малайські - желе) - продукт рослинного походження, видобувається з морських водоростей. У воді агар-агар розчиняється при температурі 80-86 ° С, твердне при 36-40. і тому використовується для ущільнення поживних середовищ для вирощування різних груп мікроорганізмів при оптимальній для них температурі.