Принципи мікробіологічної діагностики інфекційних захворювань, відбір матеріалу, вибір

Мета мікробіологічних досліджень - встановити факт наявності або відсутності збудника в організмі хворого і на об'єктах навколишнього середовища.

Завдання мікробіологічних досліджень - ідентифікувати мікроорганізми в ис-які належать їм матеріалі, визначити їх видову приналежність, морфологічні, біохімічні, токсигенні і антигенні властивості, а також встановити чутливість виділених мікроорга-низмов до антимікробних препаратів. Незважаючи на те, що проведення мікробіологічних досліджень відноситься до компетенції мікробіологів, кожен лікар, що має справу з інфекційними захворюваннями, повинен знати, як і коли необхідно відбирати матеріал для досліджень, на які дослідження його направляти і як інтерпретувати отримані результати.

Відбір матеріалу.

Перший етап будь-якого мікробіологічного дослідження становить правильний вибір матеріалу для дослідження. Його визначають властивості збудника і патогенез викликається ним захворювання. При ураженнях окремих органів і систем доцільно відбирати матеріал відпо-ють локалізації. При відсутності поразок досліджують кров, а потім відбирають зразки з урахуванням клінічної картини захворювання і доступності матеріалу для дослідження. Так, при лихоманці неясного генезу спочатку проводять посів крові; потім, при появі симптомів більш конкретних проявів, наприклад пневмонії, проводять забір мокроти.

Зразки слід забирати до призначення антимікробної терапії, з дотриманням правил асептики для запобігання забрудненню матеріалу. Кожен зразок слід розглядати як потенційно небезпечний. При заборі, транспортуванні, зберіганні і роботі з ним необхідно дотримуватися правил біологічної безпеки. Матеріал збирають в обсязі достатньому для всього комплексу досліджень. Мікробіологічні дослідження слід починати негайно після надходження зразка в лабораторію.

Вибір матеріалу для дослідження повинен відповідати характеру інфекційного процесу. Так, наприклад, при встановленні етіології пневмонії матеріалом повинна бути мок-рота, а не слина, а при ранових інфекціях виділення слід забирати з глибини рани, а не з її поверхні.

Вибір лабораторних досліджень

Основу мікробіологічної діагностики інфекційних захворювань складають микроско-пическое, мікробіологічні, біологічні, серологічні та алергологічні методи.

Мікроскопічні методи включають приготування мазків і препаратів для микроскопирования. У більшості випадків результати мікроскопічних досліджень носить Орієнтовна характер (наприклад, визначають ставлення збудників до фарбування), так як мно-Гії мікроорганізми позбавлені морфологічних ітинкторіальних особливостей. Проте мікроскопією матеріалу можна визначити деякі морфологічні ознаки збудників-лей (наявність ядер, джгутиків, внутрішньоклітинних включень і т.д.), а також встановити факт наявності або відсутності мікроорганізмів в надісланих зразках.

Мікробіологічні методи - «золотий стандарт» мікробіологічної діагностики, так як результати мікробіологічних досліджень дозволяють точно встановити факт наяв-чия збудника в досліджуваному матеріалі. Ідентифікацію чистих культур (до виду мікроорганізму) проводять з урахуванням морфологічних, тинкторіальних, культуральних, біохімічес-ких, токсигенних і антигенних властивостей мікроорганізму. Більшість досліджень включає визначення чутливості до антимікробних препаратів у виділеного збудника. Для епідеміологічної оцінки ролі мікроорганізму проводять внутрішньовидову ідентифікацію визначенням фаговаров, биоваров, резістентваров і т.д.

Біологічні методи спрямовані на визначення наявності токсинів збудника в досліджуваному матеріалі і на виявлення збудника (особливо при незначному вихідному содер-жаніі в досліджуваному зразку). Методи включають зараження лабораторних тварин досліджуючи-мим матеріалом з наступним виділенням чистої культури патогена, або встановленням факту присутності мікробного токсину та його природи. Моделювання експериментальних інфекцій у чутливих тварин - важливий інструмент вивчення патогенезу заболева-ня і характеру взаємодій всередині системи мікроорганізм-макроорганізм. Для проведе-ня біологічних проб використовують тільки здорових тварин певних маси тіла і віку. Інфекційний матеріал вводять всередину, в дихальні шляхи, внутрішньочеревно, внут-рівенно, внутрішньом'язово, внутрішньошкірно і підшкірно, в передню камеру ока, через отвір трепанації черепа, субокципітально (в більшу цистерну головного мозку). У живіт-них прижиттєво забирають кров, ексудат з очеревини, після загибелі - кров, шматочки різних органон, спинномозковій рідині, ексудат з різних порожнин.

Серологічні методи виявлення специфічних АТ і Аг збудника - важливий інструмент в діагностиці інфекційних захворювань. Особливу цінність вони мають в тих випадках, коли виділити збудник не представляється можливості. При цьому необхідно виявити підвищення титрів АТ, в зв'язку з чим досліджують парні зразки сироватки, взяті в інтервалі 10-20 діб (іноді цей інтервал може бути більш тривалим). АТ зазвичай з'являються в крові на 1-2-й тиждень захворювання і циркулюють в організмі відносно довго, що дозволяє використовувати їх виявлення для ретроспективних епідеміологічних досліджень. Визначення класів lg чітко характеризує етапи інфекційного процесу, а також може бути непрямим прогностичним критерієм. Особливе значення мають методи виявлення мікробних Аг. У значних кількостях вони з'являються вже на самих ранніх термінах, що робить їх ідентифікацію важливим інструментом експрес-діагностики інфекційних захворювань, а кількісне їх визначення в динаміці інфекційного процесу служить критерієм ефективності проведеної антимікробної терапії.

Аг багатьох збудників володіють сенсибілізуючої дії, що використовують для діагностики інфекційних захворювань, а також при проведенні епідеміологічних досліджень. Найбільшого поширення знайшли шкірно-алергічні проби, які включають внутрішньошкірне введення Аг (алергену) з розвитком реакції ГЗТ. Шкірні проби знайшли застосування в діаностіка таких захворювань як сап, меліодіоз, бруцельоз. Найбільш відома проба Манту. Використовувана як для діагностики туберкульозу, так і для оцінки несприйнятливості організму до збудника.