Мікротом санний і заморожують

Мікротом - пристрій для виготовлення тонких гістологічних зрізів тканин тварин і рослин. Мікротом складається з рухомого столика, в якому закріплений об'єкт, і мікротомних ножа. У деяких мікротомів столик з об'єктом щораз піднімається на задану висоту, рівну товщині зрізу, а ніж переміщається в горизонтальній площині, розсікаючи тканину. Іноді ніж укріплений нерухомо, а переміщається по вертикалі столик з об'єктом, кожен раз насуваючись на лезо ножа.

Мал. 1. Санний мікротом: 1 - мікрометричний гвинт; 2 - перекидний механізм подачі; 3 - гвинт, що фіксує стрижень підстави об'ектодержателя; 4 - стрижень підстави об'ектодержателя.

Санні мікротоми (рис. 1) використовують для отримання зрізів тканин, попередньо укладених в парафін або целлоидин. Основні частини санного мікротома: станина, механізм мікроподачі, механізм підйому, об'єктні санчата з затискачем для тканини, супорт з ножедержателем. Для отримання зрізів нефіксованим тканини, а також у випадках, коли необхідно вивчити об'єкт в короткий проміжок часу, використовують заморожують мікротоми (рис.2), забезпечені заморожуючим столиком, на якому зміцнюється досліджуваний об'єкт. Столик гнучким шлангом з'єднаний з металевим балоном, в якому знаходиться рідка вуглекислота. Для заморожування тканинних блоків застосовують також термоелектричний охолоджуючий столик (ТОС-1) з селеновим випрямлячем: електричний прилад, корпус якого має робочу охолоджуючу поверхню і штуцери для підведення води і електричного струму.

Мал. 2. заморожувати мікротом.

Мікротом слід утримувати в чистоті і регулярно змащувати поверхні тертя (напрямні станини, різьбова частина мікровінта, спрямовуюча і труться поверхні механізму підйому) вазеліновим маслом. Для приготування надтонких зрізів, придатних для дослідження під електронним мікроскопом. застосовують ультрамікротоми.

Найбільшого поширення останнім часом отримали ультрамікротоми, що складаються з сталевого стрижня, на одному кінці якого укріплений об'єкт, затиснутий в тримачі, а інший пов'язаний з основою приладу стрічкової пружиною. Стрижень вільно переміщається вгору і вниз, що здійснюється за допомогою електромотора, вал якого пов'язаний зі стрижнем. При опусканні стрижня об'єкт проходить повз ножа (скляного, алмазного) і зріз виявляється на поверхні рідини ванночки, прикріпленою до ножа. Точність повернення ножа в початкове положення дорівнює ± 10 Å.

Мікротом (від грец. Mikros - малий і tome - розрізання, відсікання) - прилад для виготовлення гістологічних зрізів. Серед існуючих моделей мікротомів найбільш поширені санні, радіальні і ротаційні (рис. 1-4). Основними частинами мікротома є: масивна станина (корпус), що подає механізм з мікрометричним гвинтом, тримач об'єкта (або столик) і утримувач мікротомних ножа.

У санних мікротомів (рис. 3 і 4) у верхній частині станини розташовані шліфовані площині, по яких ковзає масивний рухливий супорт. В супорті закріплений тримач ножа, забезпечений пристроєм, який дозволяє встановити ніж або поперечно до напрямку його руху (для заморожених і парафінових зрізів), або косо (для целлоідінових зрізів), а також змінювати кут нахилу ножа. При відведенні ножа назад до відмови включається напівавтоматичний механізм, що подає, що піднімає держатель об'єкта (столик) на задану кількість мікронів.

Тримач об'єкта забезпечується гвинтами, що дозволяють закріпити блок в потрібному положенні по відношенню до площини руху ножа. Мікрометричний гвинт механізму, що подає в більшості сучасних моделей встановлюється в похилій площині, але випускаються і моделі з вертикальним розташуванням гвинта.

Рідше в санних мікротомів ніж встановлюється нерухомо, а по шліфованим площинах пересувається об'єкт з власником.

У радіальних мікротомів (рис. 1) держатель ножа закріплений у одного з його кінців і регулюванню піддається лише кут нахилу ножа. Подаючий механізм з вертикальною установкою мікрометричного гвинта включається, як і в санних мікротомів, при відведенні ручки від себе. Мікротоми цих двох типів зазвичай мають пристрій, що дозволяє замінювати держатель об'єкта для залитих в парафін або целлоидин шматочків спеціальним столиком для отримання заморожених рідким вуглекислим газом зрізів. Радіальні мікротоми не завжди дозволяють отримати досить тонкі зрізи з залитого в парафін і особливо в целлоидин матеріалу. Найчастіше ці мікротоми застосовують для отримання заморожених зрізів; нерідко їх називають «заморожує мікротомів».

Ротаційний мікротом (рис. 2) має нерухомий ніж, горизонтально закріплений лезом вгору. Тримач об'єкта пересувається вгору і вниз шляхом обертання колеса рукою або мотором. Спеціальний механізм висуває власник об'єкта при кожному його піднятті на задану кількість мікронів. Зрізи один за іншим сповзають з ножа на спеціальну стрічку, що рухається синхронно з власником. Цей тип мікротома особливо зручний для отримання серійних зрізів з залитого в парафін матеріалу.

Названі типи мікротомів дозволяють отримувати зрізи не тонше 1 мк (зазвичай 5-15 мк). Для отримання більш тонких зрізів, наприклад для роботи з електронним мікроскопом, служать ультратоми і ультрамікротоми (див.).

Див. Також Гистологическая техніка.

Мал. 1. Радіальний мікротом зі столиком для заморожування об'єкта.
Мал. 2. Ротаційний мікротом зі стрічкою для приймання серійних зрізів.
Мал. 3. Санний мікротом (загальний вигляд)
Мал. 4. Схема пристрою великого санного мікротома з похилою площиною: а - вид збоку; б - вид зверху; 1 - станина; 2 - шайба з розподілами для неавтоматической подачі об'єкта; 3 - полози для ковзання об'ектодержателя; 4 - шпиндель мікрометра; 5 - стік для крапельної ванни; 6 - крапельна ванна; 7 - штанга для напівавтоматичного подачі об'єкта; 8 - держатель об'єкта; 9 - тримач ножа; 10 - ніж; 11 - блок ножа; 12 - полози для ковзання блоку.