Методи мікробіологічної діагностики інфекційних хвороб, безкоштовні курсові, реферати та
Мікробіологічні (бактеріологічні, мікологічні, вірусологічні) методи засновані на виділенні чистої куль-тури збудника і її подальшої ідентифікації на основа-нии морфологічних, культуральних, біохімічних, антиген-них (серологічних) та інших ознак. Маючи в своєму розпорядженні чистої культурою бактерій, можна визначити їх родову і видову приналежність, фактори патогенності, а також чутливість-ність до антибіотиків і хіміотерапевтичних препаратів.
Мікологічні дослідження здійснюються рідше, ніж бактеріологічні, оскільки мікроскопічна діагностика мікозів досить надійна. Мікологічні дослідження про-водять при діагностиці кандидозов шляхом визначення наростити-ня кількості клітин дріжджоподібних грибів роду Candida, а також глибоких мікозів.
Вірусологічні методи є найбільш достовірним в діагностиці вірусних інфекцій. Однак його трудомісткість, пов'язана з приготуванням культури клітин, обробкою дослі-дуємо матеріалу, а також з порівняно частим отри-ням негативних результатів, обмежують застосування дан-ного методу. Крім того, він вимагає витрати порівняно біль-шого часу, ...
особливо при проведенні «сліпих» пасажів. У багатьох випадках вірусологічний метод використовують для ретроспективної діагностики вірусних інфекцій.
Всі мікробіологічні методи мають визначальне зна-ня в лабораторній діагностиці, є найбільш інформа-тивними і достовірними, особливо якщо вони підтверджені до-виконавчими серологічними даними.
73. Збудники черевного тифу і паратифів. Таксономія. Характеристика. Лабораторна діагностика. Специфічна профілактика і лікування.
Черевний тиф і паратифи А і В- гострі кишкові інфек-ції, що характеризуються ураженням лімфатичного апарату ки-шечника, вираженою інтоксикацією. Їх збудниками є відповідно Salmonella typhi, Salmonella paratyphi А і Salmonella schottmuelleri.
Таксономічне положення. Збудники черевного тифу і паратифів А і В належать до відділу Gracilicutes, сімей-ству Enterobacteriaceae, родуSalmonella.
Морфологічні та тинкторіальних властивості. Сальмонели - дрібні грамнегативні палички із закругленими кінця-ми. В мазках розташовуються безладно. Не утворюють спор, мають мікрокапсулу, перитрихи.
Культуральні властивості. Сальмонели - факульта-тивні анаероби. Оптимальними для росту є темпера-туру 37С. Ростуть на простих поживних середовищах. Елективної середовищем для сальмонел є жовчний бульйон.
Біохімічна активність сальмонел досить висока, але вони не зброджують лактозу. S.typhi менш активна, ніж збудники паратифів.
Антигенні властивості і класифікація. Сальмо-Неллі мають О-і H-антигени, що складаються з ряду фракцій. Кожен вид має певний набір антигенів. Всі види сальмонел, що мають загальну так називаються ваемого групову фракцію О-антигену, об'єднані в одну групу. Таких груп в даний час налічується близько 65. S.typhi і деякі інші сальмонели мають Vi- антиген (раз-новідность К-антигену), з цим антигеном пов'язують вірулен-тність бактерій, їх стійкість до фагоцитозу.
Фактори патогенності. Сальмонели утворюють ендо- токсин, що володіє ентеротропним, нейротропним і пірогенним дією. З білками зовнішньої мембрани пов'язані адгезивні властивості, наявність мікрокапсули обумовлює стійкість до фагоцитозу.
Резистентність. Сальмонели досить стійкі до низ-кою т-ре. Дуже чутливі до дезінфікуючих речовин, високій температурі, ультрафіолетовим променям. У харчових продуктах (м'ясі, молоці) сальмонели можуть не тільки довго зберігатися, але і розмножуватися.
Епідеміологія. Черевний тиф і паратифи А - антропонозние інфекції; джерелом захворювання є хворі люди і бактеріоносії. Джерелом паратифу В можуть бути також сільськогосподарські тварини. Механізм зараження фекально-оральний. Серед шляхів передачі переважає водний.
Патогенез. Збудники потрапляють в організм через рот, досягають тонкої кишки, де в її лімфатичних утвореннях розмножуються і потім потрапляють в кров (стадія бактеріємії). З потоком крові вони розносяться по всьому організму, проникаючи в паренхіматозні органи (селезінку, печінку, нирки, кістковий мозок). При загибелі бактерій звільняється ендотоксин, що викликає інтоксикацію. З жовчного міхура, де С. можуть тривалий час зберігатися, вони знову потрапляють в ті ж лімфатичніосвіти тонкої кишки. В результаті повторного надходження С. може розвинутися алергічна реак-ція, що виявляється у вигляді запалення, а потім некрозу лим-фатические утворень. Сальмонели виводяться з організму з сечею та калом.
Клініка. Клінічно черевний тиф і паратифи неразлі-чіми. Інкубаційний період складає 12 днів. Хвороба починається гостро: з підвищення температури тіла, по-явища слабкості, стомлюваності; порушуються сон і апетит. Для черевного тифу характерні помутніння свідомості, марення, галюцинації, висип. Дуже важкими ускладненнями є прорив стінки кишки, перитоніт, кишкова кровотеча, що виникають в результаті некрозу лімфатичних утворень тонкої кишки.
Імунітет. Після перенесеної хвороби імунітет ін-ний і тривалий.
Лабораторна діагностика. Основний метод діа-гностики - бактеріологічний: посів та виділення S. typhi з крові (гемокультура), фекалій (копрокультура), сечі (урінокультура), жовчі, кісткового мозку. РИФ для виявлення антигену-на збудника в біологічних рідинах. Серологічний ме-тод виявлення О-і Н-антитіл в РПГА. Бактеріоносіїв виявляють по виявленню Vi-антитіл в сироватці крові з по-міццю РПГА і позитивного результату бактеріологічного; виділення збудника. Для внутрішньовидової ідентифікації застосовують фаготіпірованіе.
Лікування. Антибіотики. Іммуноантібіотікотерапія.
Профілактика. Санітарно-гігієнічні заходи. ВАКЦ-нація - брюшнотифозная хімічна і брюшнотифозная спиртова вакцина, обогащеннаяVi-антигеном. Для екстреної профілактики - черевнотифозний бакте-ріофаг.
74. Збудники ешеріхіозов. Таксономія. Характеристика. Роль кишкової палички в нормі та патології. Лабораторна діагностика. Лікування.
Ешерихіози - інфекційні хвороби, збудником яких є Escherichia coli.
Розрізняють ентеральні (кишкові) і паренте-ральних ешеріхіози. Ентеральні ешеріхіози - гострі інфек-ційних хвороби, які характеризуються переважним пора-ням ШКТ. Вони протікають у вигляді спалахів, збудниками є діареегеннимі штами E.coli. Парентеральні Ешеріхія-ози - хвороби, що викликаються умовно-патогенними штамами E.coli - представниками нормальної мікрофлори товстої киш-ки. При цих хворобах можливе ураження будь-яких органів.
Таксономічне положення. Збудник - кишеч-ва паличка - основний представник роду Escherichia, сімей-ства Enterobacteriaceae, що відноситься до відділу Gracilicutes.
Морфологічні та тинкторіальних властивості. E. coli - це дрібні грамнегативні палички з закругленими кінцями. В мазках вони розташовуються безладно, не утворюють спор, перитрихи. Деякі штами мають мікрокапсулу, пили.
Культуральні властивості. Кишкова паличка - факультативний анаероб, оптим. темп. для зростання - 37С. E. coli не вимоглива до живильних середовищ і хоро-шо зростає на простих середовищах, даючи дифузне помутніння на рідких і утворюючи колонії на щільних середовищах. Для діагностики ешеріхіозов використовують диференційно-діагности-етичні середовища з лактозою - Ендо, Левіна.
Ферментативна ак-тівность.E. coli володіє великим набором різних ферментів. Найбільш характерною ознакою E. coli є її здатність ферментувати лактозу.
Антигенна структура. Кишкова паличка має со-тичних О, жгутиковим Н і поверхневим К-антигену-ми. О-антиген має більше 170 варіантів, К-антиген - понад 100, Н-антиген - більше 50. Будова О-антигену визначає приналежність до серогрупи. Штами E. coli, які мають властивий їм набір антигенів (ан-тігенную формулу), називаються серологічними варіантами (серовар).
За антигенними, токсигениих, властивостям разли-ють два біологічних варіанта E. coli: 1) умовно-патоген-ні кишкові палички; 2) «безумовно» патогенні, діареегеннимі.
Фактори патогенності. Утворює ендотоксин, що володіє ентеротропним, нейротропним і пірогенним дією. Діареегеннимі ешерихії продукують ек-зотоксін викликає значне на-рушення водно-сольового обміну. Крім того, у деяких штам-мов, як і збудників дизентерії, виявляється інвазивний фактор, що сприяє проникненню бактерій всередину клітин. Патогенність діареегенних ешерихій - у виникненні геморагії, в нефротоксичної дії. До факторів патогенності всіх штам-мов E.coli відносяться пили і білки зовнішньої мембрани, що сприяють адгезії, а також мікрокапсула, перешкоджає-ющая фагоцитозу.
Резістентность.E. coli від-Ліча більш високу стійкість до дії різних факторів зовнішнього середовища; вона чутлива до дезінфектантів, швидко гине при кип'ятінні.
РольE. coli. Кишкова паличка - представник нормаль-ної мікрофлори товстої кишки. Вона є антагоністом патогенних кишкових бактерій, гнильних бактерій і грибів роду Candida. Крім того, вона бере участь в синтезі вітамінів групи В, Е і К, частково розщеплює клітковину.
Штами, що мешкають в товстій кишці і є умовно-патогенні-ми, можуть потрапити за межі шлунково-кишкового тракту і при зниженні імуно-тета і їх накопиченні стати причиною різних неспеціфічес-ких гнійно-запальних захворювань (циститів, холециститів) - парентеральних ешеріхіозов.
Епідеміологія. Джерело ентеральних ешеріхіозов - хворі люди. Механізм зараження - фекально-оральний, шляхи передачі - аліментарний, контактно-побутовий.
Патогенез. Порожнина рта.Попадает в тонку кишку, адсорбується в клітинах епітелію за допомогою пілей і білків зовнішньої мембрани. Бактерії розмножуються, гинуть, освоєння-бождая ендотоксин, який підсилює перистальтику кишечнику-ника, викликає діарею, підвищення температури тіла та інші симптоми загальної інтоксикації. Виділяє екзотоксин - важка діарея, блювання і значне порушення водно-сольового обміну.
Клініка. Інкубаційний період складає 4 дні. Бо-лезнь починається гостро, з підвищення температури тіла, болю в животі, проносу, блювоти. Відзначаються порушення сну і Аппе-тита, головний біль. При геморагічної формі в калі обнаружи-ють кров.
Імунітет. Після перенесеної хвороби імунітет не-міцний і нетривалий.
Лабораторна діагностика. Основний метод - бак-теріологічних. Визначають вид чистої культури (грамнегативні палички, оксідазоотріцательние, ферментують глюкозу і лактозу до кислоти і газу, що утворюють індол, не утворюють сірководень) і приналежність до серогрупи, що дозволяє, відрізнити умовно-патогенні кишкові палички від діареегенних. Внутрішньовидова ідентифікація, що має епідеміологічес-кое значення, полягає у визначенні серовара за допомогою діагностичних адсорбованих імунних сироваток.
Профілактика: дотримання санітарного режиму, виявлення бактеріоносіїв. Специфічної профілактики немає.
Лікування: Для лікування хворих дітей раннього віку використовують бифидобактерин, лактобактерин, тобто препарати, що містять молочнокислі бактерії, які є антагоністами Е.Coli. Дорослим - антибіотики широкого спектру.
75. Збудники шигельозу. Таксономія. Характеристика. Лабораторна діагностика. Лікування.
Рід Shigella включає 4 види: S. dysenteriae - 12 сероварів, S.flexneri - 9 сероварів, S. boydii - 18 сероварів, S. sonnei - 1 серовар.
Морфологія. Шигели представле-ни нерухомими паличками. Суперечка і капсул не утворюють.
Культуральні властивості. Добре кукси-віруются на простих поживних середовищах. На щільних середовищах утворюють дрібні голод-кі, блискучі, напівпрозорі колонії; на рідких - дифузне помутніння. Рідким середовищем збагачення є селенітовий бу-льон. У S. sonnei відзначена при зростанні на пліт-них середовищах S-R-дисоціація.
Біохімічна активність: слабка; відсутність газоутворення при ферментації глюкози, відсутність продукції сірководню, відсутність ферментації лактози.
Резистентність. Найбільш нестійкий у зовнішньому середовищі вид S. dysenteriae. Шигели переносять висушування, низькі темпі-ратури, швидко гинуть при нагріванні. S. sonnei в молоці здатні не тільки тривалий час пере-проживати, але і розмножуватися. У S. dysenteriae відзначений перехід в некультивованих форму.
Антигенна структура. Соматичний О-антиген, в зависи-мости від будови якого відбувається їх підрозділ на серовар, a S. flexneri внут-ри сероварів підрозділяється на подсеровари. S. sonnei володіє антигеном 1-ї фази, кото-рий є К-антигеном.
Фактори патогенності. Здатність викликати інвазію з пос-ледующім міжклітинних поширенням і розмноженням в епітелії слизової товстого кишечника. Функціонально-онирования великої плазміди інвазії, кото-раю є у всіх 4 видів шигел. Плазмида інвазії детермінує синтез білків, що входять до складу зовнішньої мембрани, які забезпечують процес інвазії слизової. Продукують шига і шігаподобние білкові токсини. Ендотоксин захищає шигели від чинному законо-твия низьких значень рН і жовчі.
Епідеміологія: Захворювання - шигельози, антропонози з фекально-оральним механізмом переда-чі. Захворювання, що викликається S. dysenteriae, має контактно-побутовий шлях передачі. S. flexneri - водний, a S. sonnei - Аліментаріа-ний.
Патогенез і клініка: Інфекційні заболева-ня, які характеризуються ураженням товсто-го кишечника, з розвитком коліту і ІНТОКС-каціей.
Шигели взаємодіють з епітелієм слизової тол-стій кишки. Прикріплюючись інвазіни до М-клітинам, шигели поглинаються макрофагами. Взаємодія шигелл з макрофагами призводить до їх загибелі, наслідком чого є виділення ІЛ-1, який ініціює воспа-ня в підслизової. При загибелі шигел відбувається виділення шига токсинів, дія яких призводить до появи крові в випорожненнях.
Імунітет. Секреторні IgA, пре-дотвращающіе адгезію, і цитотоксическая антитілозалежна активність лімфоцитів.