Культуральне дослідження - студопедія

Метод посіву і виділення чистих культур збудників захворювання служить «золотим стандартом» мікробіологічної діагностики. Для посіву матеріал беруть з сечовипускального каналу, шийки матки, піхви, глотки і прямої кишки. Культуральне дослідження поряд з мікроскопією - основний метод при діагностиці гонореї, трихомоніазу, хламідіозу. Методи молекулярнобиологические дослідження поки недостатньо специфічні для виявлення цих збудників ІПСШ, щоб витіснити класичні методи, але, безсумнівно, їм належить майбутнє (рис.1). Інша ситуація склалася з опортуністичними інфекціями статевих шляхів, число яких в еру антибіотиків і урбанізації життя суспільства неухильно збільшується, динамічно змінюється їх етіологічна структура і чутливість до антибіотиків. Часта антибіотикорезистентності цих мікроорганізмів стає причиною неефективності лікування, тому адекватний вибір раціональної етіотропної терапії в сучасних умовах визнають постійної клінічної проблемою.

Відомо, що збудниками запальних процесів статевих органів можуть бути різноманітні УПМ, в нормі що входять до складу транзиторного компонента індігенной (нормальної) мікрофлори. Їх патогенні властивості проявляються лише в певних умовах порушення імунного гомеостазу макроорганізму і місцевої колонізаційної резистентності. У цих умовах для мікробіологічної оцінки повинна враховувати можливу етіологічну роль широкого кола патогенів, а не тільки будь-якого конкретного збудника, як при діагностиці класичних інфекційних захворювань, що викликаються абсолютними патогенами. Завданням дослідження стає не тільки ідентифікація мікроорганізмів, виявлених в патологічному матеріалі, а й обгрунтування їх етіологічної ролі в запальному процесі. Тому при посіві клінічного матеріалу, особливо з локусів, і в нормі мають мікрофлору, дуже важливо використовувати найбільш універсальні поживні середовища, які придатні для культивування широкого кола мікроорганізмів. При цьому необхідно враховувати кількісні співвідношення зростання різних видів мікроорганізмів в первинному посіві, так як істинному збудника найчастіше належить переважаюча роль серед ассоціантов. Однак є види, які і в невеликій кількості виявляють патогенні властивості (стрептококи груп А і В, протеї, клебсієли, золотистий стафілокок, лістерії і ін.).

Лабораторна діагностика опортуністичних інфекцій а базується на інтегральній оцінці результатів мікроскопічного і культурального досліджень. При цьому строго анаеробний компонент оцінюють по мікроскопії граммазков - велика кількість анаеробних морфотипов, що виявляються при світловій мікроскопії, свідчить про їх етіологічної ролі. При цьому визначення чутливості анаеробів до антибіотиків в даний час не має клінічної доцільності, так як в переважній більшості вони високочутливі до антибіотиків з антіанаеробной активністю (кліндаміцин, метронідазол).

Навпаки, що стосується факультативно-анаеробних і аеробних мікроорганізмів, то діагностична цінність мікроскопічного дослідження виділень слизових значно знижується. Це пов'язано, по-перше, з тим, що патогенні можливості цих бактерій можуть виявлятися при порівняно невеликому (3 - 5 lg КУО / мл) їх кількості, яка не виявляють при мікроскопії. По-друге, навіть якщо морфотіпи факультативно-анаеробних бактерій виявляють в граммазках, морфологічно вони однотипні у багатьох видів і родів бактерій (це коліформні палички або коки). У той же час їх патогенні властивості і чутливість до антибіотиків можуть бути дуже різними. Тому для характеристики факультативно-анаеробної частини мікроценозу, а також мікроаерофілов (в першу чергу лактобацил), які по морфології можуть бути подібними з багатьма видами облігатно-анаеробних бактерій (клостридії, еубактеріі, пропіонібактеріі і ін.), Необхідно культуральне дослідження - посів вагінального відокремлюваного . Для цих цілей використовують 5% кров'яний агар (найбільш універсальне середовище для більшості УПМ), агар Сабуро (для виділення грибів), середу МРС (для культивування лактобацил).

Результати культурального дослідження дають можливість оцінити видовий склад і кількісне співвідношення різних видів в асоціації мікроорганізмів, в тому числі грибів, а також лактобацил, і тим самим підтвердити приналежність до роду лактобацил тих лактоморфотіпов, які були виявлені при мікроскопії граммазков. Виділення з патологічного матеріалу та ідентифікація різних видів сімейства Enterobacteriaceae. стафілококів, стрептококів, неферментуючих бактерій, нейссерий, коринебактерій, грибів та інших мікроорганізмів після кількісної оцінки їх зростання дозволяє визначити ступінь їх етіологічної значимості у розвитку захворювань у конкретного пацієнта.

Крім того, у випадках коли діагноз кандидозу встановлений при мікроскопії грамнегативною мазка, результати посіву можуть виявити підвищені титри УПМ (гриби, ентерококи, коліформні і інші бактерії), які можуть стати причиною ускладнень після етіотропної терапії препаратами з антіанаеробной активністю. Особливо слід мати на увазі мікроорганізми, які навіть в низьких концентраціях служать фактором підвищеного ризику для внутрішньоутробного плода (лістерії, стрептококи груп А і В).

Матеріалом для дослідження служать виділення з сечівника, шийки матки, піхви, глотки, прямої кишки. Метод характеризується високою точністю. Його називають «золотим стандартом», так як метод визначає невеликі концентрації збудників в матеріалі пацієнта, визначає саме життєздатні мікроорганізми, дозволяє визначати чутливість мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів. Чутливість і специфічність методу складає 80 - 90%.

Серйозним недоліком цього методу є те, що він займає дуже багато часу (ряду мікроорганізмів необхідно для зростання кілька днів або навіть тижнів).

Метод вимагає наявності якісних поживних середовищ, спеціальні умови культивування для різних мікроорганізмів. Деякі мікроорганізми є труднокультівіруемимі або некультивованих, необхідні до живильних середовищ (це характерно для внутрішньоклітинних і вірусних інфекцій).

Малюнок 1 - Хламідії культуральним методом