естрадіолу гемігідрат

Близько 1 мг препарату змішують з 0,5 мл свіжоприготованого сульфомолібденового реактиву. З'являється синє забарвлення. В ультрафіолетовому світлі (365 нм) розчин має інтенсивне зелене флуоресценцию. При додаванні 1 мл концентрованої кислоти сірчаної і 9 мл води забарвлення стає рожевою з жовтуватою флуоресценцией.

(Сульфамолібденовий реактив: 50 мг амонію молібдату розчиняють в 10 мл концентрованої кислоти сірчаної).

Близько 50 мг препарату (точна наважка) розчиняють в мірній колбі місткістю 50 мл в етанолі, доводять обсяг до мітки тим же розчинником. 5 мл отриманого розчину розводять в мірній колбі місткістю 250 мл 0,1 М розчином натрію гідроксиду до мітки. Вимірюють оптичну щільність отриманого розчину на спектрофотометрі в кюветі з товщиною шару 10 мм в максимумі при довжині хвилі 238 нм на тлі 0,1 розчину натрію гідроксиду.

D- оптична щільність досліджуваного розчину;

а - точна наважка препарату (г);

- питомий показник поглинання естрадіолу гемігідрату при довжині хвилі 238 нм, рівний 335.

Препарат повинен містити не менше 97% і не більше 103% естрадіолу гемігідрату.

таблетки етинілестрадіолу

1. Кількість порошку розтертих таблеток, що містить 1 мг етинілестрадіолу, збовтують з 10 мл етанолу і фільтрують.

Фільтрат випарюють насухо на водяній бані. До сухого залишку додають 1 мл кислоти сірчаної концентрованої; з'являється оранжеве забарвлення з зеленою флуоресценцією (в Уф-світлі, довжина хвилі 365 нм). При розведенні розчину 10 мл води: забарвлення стає фіолетовою і випадає фіолетовий осад.

2. Кількість порошку розтертих таблеток, що містить 2 мг етинілестрадіолу, збовтують з 10 мл етанолу і фільтрують. Фільтрат випарюють насухо на водяній бані до об'єму 2 мл, додають 1 мл 10% розчину срібла нітрату; утворюється білий осад.

3. Кількість порошку розтертих таблеток, що містить 0,1 мг етинілестрадіолу, розтирають з 0,5 мл 0,1 М розчину натрію гідроксиду і 5 мл води, залишають на 5 хвилин. Потім фільтрують, фільтрат підкисляють 0,15 мл кислоти сірчаної концентрованої, додають 3 мл ефіру, збовтують. Ефірний шар відокремлюють і нагрівають на водяній бані з 0,2 мл кислоти оцтової льодяної і 2 мл кислоти фосфорної концентрованої. З'являється рожеве забарвлення з інтенсивною помаранчевої флуоресценцией.

4. Кількість порошку розтертих таблеток, що містить 5 мг етинілестрадіолу, збовтують з 3 мл 10% розчину натрію гідроксиду та 2 мл води, залишають на 5 хвилин і потім фільтрують. До фільтрату додають 3 мл діазореактивом; з'являється червоне забарвлення.

Ідентифікація естрогенів методом ТШХ

(Етинілестрадіол, естрадіолу дипропіонат).

Хроматографирования проводять на пластинах "Силуфол UF-254" розміром 5 х 10 см. На пластину на лінію старту наносять по 0,01 мл 1% спиртових розчинів речовин і їх суміші. Хроматографіруют в системі розчинників гексан - ацетон 7: 3 висхідним способом. Після поділу пластину сушать на повітрі, детекцию плям здійснюють в УФ світлі. Розраховують значеніяRf досліджуваних речовин (приблизний значеніеR, - для естрадіолу дипропіонату а в даній системі розчинників - 0,85; для етинілестрадіолу-0,59).