Astroscope - клуб любителів астрономії, астрономічний форум

Як приготувати постійний микропрепарат?

Як приготувати постійний микропрепарат для спостережень під мікроскопом?

Купуючи мікроскоп зверніть увагу на додаткові аксесуари до нього. Вам однозначно знадобляться чисті предметні скельця, чисті покривні скла і інструменти для препарування. Можна також додатково придбати набір вже готових препаратів. Набір може складатися з рослинних зразків, зразків тваринного походження, зразків людських тканин і скам'янілостей. Кращим вибором буде комбінований набір, такий як Levenhuk N80 NG "Побачити Все!".

Можна і самостійно приготувати зразок для спостереження, але будьте готові до того, що це займе досить багато часу, потребують терпіння, уважності і вкладення додаткових коштів. Еслі Ви серйозно плануєте займатися мікробіологією, Ви зобов'язані це вміти робити.

Вам знадобляться такі матеріали:

1. Предметні скла, покривні скла
2. Яка Фіксує рідина (розчин Формідрон). Можна купити в аптеці препарат на основі формаліну 100 мл препарату містять 10 г розчину формальдегіду
3. Етиловий спирт 96% і очищена вода
4. Барвники: метиловий синій, зеленка, туш, еозин
5. Матеріал зразків і штатив-бокс для зберігання готових мікропрепаратів

Увага! Формальдегід володіє дратівливою дію, захистіть очі лабораторними очками, на руки одягніть медичні рукавички!

1. Досліджуваний зразок помістіть в фіксатор на кілька днів. Склад фіксатора - 1 частина Формідрон + 2 частини води. Мазки занурюються в НЕ розведений формідрон на 15 хвилин. Якщо не виконати даний крок, то Ваш препарат з часом просто згниє під предметним склом.

2. Другим кроком буде видалення залишків фіксатора з поверхні зразка. Помістіть препарат під слабку струмінь проточної води на кілька годин. Мазки поміщаються під струмінь води на 3-5 хвилин і після висушуються.

3. Третій крок - фарбування, процес досить творчий і цікавий. Велика частина барвників для мікропрепаратів виготовляються з кам'яновугільної смоли або похідних бензолу. Купити їх можна в хім. лабораторія і спеціалізованих магазинах, харчових виробництвах, моргах. Найбільш поширені: барвник метиленовий синій (можна купити в зоомагазині), еозин, зеленка, можна спробувати чорнило з кулькових ручок або туш.

4. Далі необхідно позбутися від вологи всередині препарату. Це передостанній етап, після слід нарізка і монтаж зразка на предметне скло. Готуємо 8-м ємностей, 4-ре для спирту, 4-ре для етанол (ізопропанол). Концентрація речовини повинна бути наступна: 50%, 70%, 96%, 99%. По черзі занурюємо на 10 хвилин зразок в етанол (ізопропанол) і спирт підвищуючи концентрацію! Завдяки даним маніпуляція етанол буде витягати надлишки рідини з мікропрепарату. Мазки занурюються на 30-60 сек.

5. Фініш! Укладаємо препарат під покривне скло. Для склеювання стекол застосовується канадський бальзам, дістати його зараз важко, його можна замінити на каніфоль розведену в уайт спирті (рідина нагадує мед або сироп). Підготовлений препарат поміщають в уайт-спірит на 5-6 годин і після нарізають на мікротому. Все, зразок готовий! Залишається лише взяти покривне скло, капнути по центру на нього краплю розведеної каніфолі і притиснути до предметного, на якому вже розташувався препарат. Краї скла не витирайте, Ви тільки розмажете залишки каніфолі по предметному склу.

6. Дайте час каніфолі трохи підсохнути і вуаля, мікромпрепарат готовий!

Висновки і результати:

Витрачено часу на приготування зразка: 3-и дня
Витрачено коштів:
Формідрон 100мл (4 грн.) + Етиловий спирт 100мл (10 грн) + Етанол 100мл (9 грн.)
Пачка предметних і покривних стекол (не самих гірших) 100 грн.
Штатив-бокс на 100 осередків 50 грн. + Витратні матеріали (уайт-спірит, вата, леза і т.д.) приблизно 30-50 грн.
Разом: приблизно 200 грн.
Задоволення: 100%

Процес приготування постійних мікропрепаратів вельми складний, вимагає додаткових знань, досвіду і часу. Кращим вирішенням питання буде використання тимчасових препаратів. Вам потрібні лише предметне скло, покривне скло і лезо, щоб зробити тоненький зріз зразка. Крім цього можна придбати набір вже готових зразків. У нашому інтернет-магазині Астроскоп Ви знайдете величезний вибір наборів препаратів на будь-який смак!

Re: Як приготувати постійний микропрепарат?

В продовження теми вирішив поділиться способом фіксації постійного «об'ємного» мікропрепарату, ну наприклад нам треба зафіксувати на предметному скло мурашки і нам не хочеться його роздавлювати покривним склом.

1. Дистильована вода
2. Фруктоза
3. Клей ПВА
4. Лак для нігтів
5. Предметний і покривні скла
6. Спирт 91% - 99%

В першу чергу необхідно збезводнити наш зразок, в даному випадку мурашки. Розміщуємо його на 3-5 хвилин в спирт (ізопропанол). Поки наш мураха знаходиться в розчині можна приготувати фіксуючу середу (фіксатор). Раніше застосовувався канадський бальзам або якийсь інший сік дерева. Тепер цих речей практично не знайти, як же вийти з положення? У цьому нам допоможе фруктоза і вода. Змішуємо воду / фруктозу один до одного, через годину фруктоза розчиняється повністю і ми отримуємо чудовий фіксатор, в якому зразок буде зберігається десятиліттями.

Фіксатор готовий, зразок готовий, тепер переходимо до підготовки предметного скла.
Беремо клей ПВА або нігтьової лак і малюємо прямокутник на склі там, де буде знаходиться наш зразок, який можна порівняти за розмірами з покривним склом. Через деякий час клей / лак висихає і виходить бортик в 1-2 мм - нам цього буде більш ніж достатньо для фіксації мурашки під предметним склом не натискайте на неї покривним.

Переходимо до фінальної стадії. Беремо мурашки і розміщуємо всередині нашого імпровізованого бортика, далі капає фіксатор - розчин фруктози, таким чином, щоб рідина заповнила все порожній простір. Далі беремо покривне скло, по його краях наносимо лак або клей ПВА і монтуємо його на предметне точно на бортик. Докладаємо спочатку один край скла, а потім другий і в цьому випадку у вас не залишиться під покривним склом бульбашок повітря. Трохи притисніть скло, тільки обережно. Далі дайте клею грунтовно висохнути і вуаля готово! Можна користуватися довгі роки.

P.S. Чому саме клей ПВА. Даний клей виготовлений з полівінілового спирту, після висихання стає прозорим і є дуже хорошим фіксатором.

Фруктозу можна купити практично в будь-якому супермаркеті у відділі для діабетиків. На відміну від столового цукру після висихання вона не кристалізується і найкращим чином підходить для наших завдань.

Re: Як приготувати постійний микропрепарат?

Зріз ялинової гілочки, збільшення 40х

Голова мушки 40х

Зріз стебла "Грошового дерева", напевно у кожного таке є на підвіконні. Збільшення 40х. Кульки на фото - бульбашки повітря, які з'явилися при неправильної підготовки препарату перед фіксацією під покривним склом.

Приготування постійних мікропрепаратів.

Чим робите зріз стебел?

Re: Приготування постійних мікропрепаратів.

Олександр Мулява писал (а): Чим робите зріз стебел?

Re: Як приготувати постійний микропрепарат?

У кого є досвід приготування постійного препарату з пилку рослин? Досить наочний і цікавий матеріал, а ось як закріпити розуму не прикладу.