Серологічні реакції в діагностиці інфекційних хвороб

Серологічні реакції позначають відповідно до феноменами, які супроводжують утворення комплексу антиген - антитіло при взаємодії різних за властивостями компонентів. Розрізняють реакції аглютинації, преципітації та лізису.

Реакція аглютинації (РА)

Реакція аглютинації (РА) заснована на застосуванні корпускулярного антигену (суспензія бактерій, сенсибілізованих еритроцитів, частинок латексу та ін.), Що взаємодіє зі специфічними антитілами, в результаті чого утворюється комплекс антиген - антитіло випадає у вигляді осаду. Цю реакцію широко застосовують в лабораторній практиці для серологічної діагностики бактеріальних інфекцій і для ідентифікації виділених мікроорганізмів.

РА використовують для діагностики багатьох інфекційних хвороб: бруцельозу (реакції Райта, Хеддльсона), туляремії, лептоспірозу (РАЛ - реакція аглютинації і лізису лептоспір), лістеріозу, висипного тифу (РАР - реакція аглютинації рикетсій), шигельозу, єрсиніозу, псевдотуберкульозу та ін.

Реакція непрямої, або пасивної, аглютинації (РИГА або РПГА).

Для постановки цієї реакції використовують еритроцити тварин (барана, мавпи, морських свинок, деяких птахів), сенсибілізованих антитілами або антигеном, що досягається інкубацією суспензії еритроцитів і розчину антигену або імунної сироватки.

Діагностикуми, отримані на основі еритроцитів, сенсибілізованих антигенами, називають антигенними еритроцитарних діагностикумами. Вони призначені для визначення антитіл в серійних розведеннях сироваток крові, наприклад еритроцитарні шигеллезной діагностикуми, еритроцитарні сальмонельозні О-діагностикуми.

Відповідно діагностикуми на основі еритроцитів, сенсибілізованих специфічними імуноглобулінами, називають антитільної (иммуноглобулинового) діагностикумами і вони служать для виявлення антигенів в різному матеріалі, наприклад еритроцитарний іммуноглобуліновий дифтерійний диагностикум для РИГА, застосовуваний для виявлення дифтерійного екзотоксину коринебактерій в рідкому поживному середовищі при посіві в неї матеріалу з носа і ротоглотки.

Реакцію гемаглютинації застосовують для діагностики як бактеріальних (черевний тиф, паратифи, дизентерія, бруцельоз, чума, холера та ін.), Так і вірусних (грип, аденовірусні інфекції, кір та ін.) Інфекцій. За чутливості і специфічності РИГА перевершує РА.

Реакція гальмування гемаглютинації (РГГА)

Реакцію гальмування гемаглютинації (РГГА) використовують для титрування противірусних антитіл в сироватках крові, а також з метою встановлення типової приналежності виділених вірусних культур. РГГА можна застосувати для діагностики тих вірусних інфекцій, збудники яких мають гемагглютінірующімі властивостями.

Принцип методу полягає в тому, що сироватка, яка містить антитіла до конкретного типу вірусу, пригнічує його гемагглютинирующих активність і еритроцити залишаються неагглютінірованнимі.

Реакція гальмування (затримки) пасивної гемаглютинації (РТПГА).

У РТПГА беруть участь три компонента: імунна сироватка, антиген (досліджуваний матеріал) і сенсибілізовані еритроцити.

Якщо в досліджуваному матеріалі є антиген, специфічно реагує з антитілами імунної стандартної сироватки, то він пов'язує їх, і при подальшому додаванні еритроцитів, сенсибілізованих антигеном, гомологічним сироватці, гемагглютинация не настає.

РТПГА застосовують для виявлення мікробних антигенів, для кількісного їх визначення, а також для контролю специфічності РПГА.

Реакція латекс-аглютинації (РЛА)

В якості носія антитіл (імуноглобулінів) використовують частки латексу. РЛА є експрес-методом діагностики інфекційних хвороб, з огляду на час проведення (до 10 хв) і можливість виявити антиген в невеликому обсязі досліджуваного матеріалу.

РЛА застосовують для індикації антигенів Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae типу b, Neisseria meningitidis в цереброспинальной рідини, виявлення стрептококів групи А в мазках із зіву, для діагностики сальмонельозу, иерсиниозов і інших захворювань. Чутливість методу складає 1-10 нг / мл, або 10 ³ -10 ⁶ бактеріальних клітин в 1 мкл.

Реакція коагглютинации (РКоА)

Реакція коагглютинации (РКоА) заснована на здатності білка А стафілококів приєднувати специфічні імуноглобуліни. РКА - метод експрес-діагностики - служить для виявлення розчинних термостабільних антигенів в секретах людини і в складі циркулюючих імунних комплексів (ЦВК). Виявлення специфічних антигенів у складі ЦВК вимагає їх попереднього осадження з сироватки крові.

реакція преципітації

В реакції преципітації (РП) в результаті взаємодії антитіл з високодисперсними розчинними антигенами (білки, полісахариди) утворюються комплекси з участю комплементу - преципітати. Це чутливий тест, який використовується для виявлення і характеристики різноманітних антигенів і антитіл. Найпростішим прикладом якісної РП є утворення непрозорої смуги преципітації в пробірці на кордоні нашарування антигену на імунну сироватку - реакція кольцепреціпітаціі. Широко застосовують різні різновиди РП в напіврідких гелях агару або агарози (метод подвійної імунодифузії, метод радіальної імунодифузії, іммуноелектрофорез).

Реакція зв'язування комплементу (РСК)

Реакція зв'язування комплементу (РСК) заснована на феномені гемолізу за участю комплементу, тобто здатна виявляти тільки комплементсвязивающіе антитіла.

РСК широко застосовують для діагностики багатьох бактеріальних і вірусних інфекцій, риккетсиозов, хламидиозов, інфекційного мононуклеозу, протозойних інфекцій, гельмінтозів. РСК є складною серологічної реакцією, в якій беруть участь дві системи: досліджувана (сироватка крові), представлена ​​системою антиген - антитіло і комплементом, і гемолітична (еритроцити барана + гемолітична сироватка). Гемолітична сироватка являє собою інактивовану прогріванням сироватку крові кролика, імунізованих еритроцитами барана. Вона містить антитіла проти еритроцитів барана.

Позитивний результат РСК - відсутність гемолізу - спостерігають в разі, якщо в досліджуваній сироватці містяться антитіла, гомологічні антигену. При цьому утворився комплекс антиген - антитіло пов'язує комплемент, а у відсутності вільного комплементу додавання гемолітичної системи не супроводжується гемолізом. У разі відсутності в сироватці антитіл, відповідних антигену, утворення комплексу антиген - антитіло не відбувається, комплемент залишається вільним і сироватка викликає гемоліз еритроцитів, тобто наявність гемолізу - це негативний результат реакції.

Ющук Н.Д. Венгеров Ю.Я.