Основні функції антитіл

2. Антитоксичний ефект.

3. Активація комплементу.

5. Чутки, комплекси (пов'язані розчинні Аг утворюють комплексно з Ат, які виводяться з організму з жовчю і сечею).

6. антителозависимой цитотоксичность.

Динаміка антитілоутворення.

Серологічні реакції в лабораторній діагностиці інфекційних захворювань.

У захисті організму від чужорідних антигенів вирішальну роль відіграють імунологічні механізми, що здійснюються антитілами і імунокомпетентними клітинами. Основа імунологічних механізмів - специфічна реакція між антитілами або лімфоцитами (утворилися під впливом потрапив в організм антигену) і антигену. Головна функція антитіл - зв'язування антигену і його подальше виведення з організму.

Однак такі реакції між антитілами і антигенами можуть відбуватися і поза організмом (in vitro) в присутності електроліту і можливі лише при наявності комплементарності (структурного подібності, спорідненості) антигену і антитіла.

Маючи специфічні антитіла проти певного антигену можна розпізнати і виявити його серед інших антигенів, а в сироватці крові антитіла проти відомого антигену.

Реакція антиген-антитіло in vitro супроводжується виникненням певного феномену - аглютинації, преципітації, лізису.

Таким чином все серологічні реакції використовуються з двома цілями:

виявлення антитіл в сироватці хворого за допомогою стандартних антигенів-діагностикумів (для серологічної діагностики інфекційних хвороб);

для виявлення невідомих антигенів по відомим стандартним сироватка, що містить антитіла певної специфічності (для серологічної ідентифікації збудників).

Наприклад, якщо сироватка хворого реагує з конкретним мікробним антигеном - значить в сироватці хворого є антитіла проти даного мікроорганізму.

Серологічна діагностика - беруть стандартний антиген (диагностикум), що представляє собою інактивовані або живі бактерії, віруси або ж їх антигени (компоненти) у фізіологічному розчині.

Серологічна ідентифікація - використовують стандартні імунні сироватки, які отримують від імунізованих тварин (в крові тварин в результаті багаторазової імунізації збудником з'являється велика кількість антитіл).

Аглютинація.

Аглютинація - серологічна реакція між антитілами (агглютининами) і антигенами (агглютініногенамі), розміщеними на поверхні бактеріальної клітини, а в результаті утворюється комплекс антиген-антитіло (агглютінати).

Механізм аглютинації - під впливом іонів електроліту зменшується негативний поверхневий заряд бактеріальної клітини і отже вони можуть зблизитися на таку відстань при якому виникає склеювання бактерій.

Макро- і мікроскопічний вигляд агглютіната:

О-аглютинація (соматична) - дрібнозернистий, при мікроскопії - бактерії склеюються полюсами клітин, утворюючи мережу.

Vi-аглютинація (капсульна) - дрібнозернистий, при мікроскопії - склеювання бактерій відбувається всією поверхнею клітини.

Н-аглютинація (жгутикових) - аглютиніни взаємодіють з джгутиками обездвиживая бактерії, при мікроскопії - крупнохлопчатая, склеювання бактеріальних клітин в області джгутиків.

Реакція аглютинації використовується для визначення антитіл в сироватці крові хворих, наприклад, при бруцельозі (реакції Райта, Хеддельсона), черевний тиф і паратифах (реакція Відаля) інших інфекційних хворобах, а також при визначенні збудника, виділеного від хворого. Цю ж реакцію застосовують для визначення груп крові з використанням моноклональних антитіл проти аллоантігенов еритроцитів.

Застосовуються різні варіанти реакції аглютинації: розгорнута, орієнтовна, непряма і ін.

Для визначення у хворого антитіл ставлять розгорнуту реакцію аглютинації: до розведень сироватки крові хворого додають суспензія вбитих мікробів (диагностикум) і через кілька годин інкубації при 37 ° С відзначають найбільше розведення (титр) сироватки, при якому сталася аглютинація, тобто утворився осад.

Характер і швидкість аглютинації залежать від виду антигену і антитіл.

Якщо необхідно визначити збудник, виділений від хворого, ставлять орієнтовну реакцію аглютинації, застосовуючи діагностичні антитіла, тобто проводять серотіпірованіе збудника. Орієнтовну реакцію проводять на предметному склі. До 1 краплі діагностичної імунної сироватки в розведенні 1:10 або 1:20 додають чисту культуру збудника, виділеного від хворого. Якщо з'являється пластівчастий осад, то реакцію проводять в пробірках з збільшуються разведениями діагностичної сироватки, додавав в кожну дозу сироватки 2-З краплі суспензії збудника. Реакцію вважають позитивною, якщо аглютинація відзначається в розведенні, близькому до титру діагностичної сироватки. В контролях (сироватка, розведена фізіологічним розчином хлориду натрію, або суспензія мікробів в тому ж розчині) осад у вигляді пластівців повинен бути відсутнім.

Різні родинні бактерії можуть агглютинироваться однієї і тієї ж діагностичної агглютинируют сироваткою, що ускладнює їх ідентифікацію. Тому користуються адсорбованими аглютинативна сироватками, з яких видалені перехресно реагують антитіла шляхом адсорбції їх родинними бактеріями. У таких сироватках зберігаються антитіла, специфічні тільки до даної бактерії. Отримання таким способом монорецепторними діагностичних агглютинирующих сироваток було запропоновано А.Кастелляні (1902). Реакція непрямої (пасивної) гемаглютинації (РНГА) заснована на використанні еритроцитів (або латексу) з адсорбованими на їх поверхні антигенами або антитілами, взаємодія яких з відповідними антитілами або антигенами сироватки крові хворих викликає склеювання і випадання еритроцитів на дно пробірки або осередки у вигляді фестончатого осаду . РНГА застосовують для діагностики інфекційних хвороб, визначення гонадотропного гормону в сечі при встановленні вагітності, для виявлення підвищеної чутливості до лікарських препаратів і гормонів і в деяких інших випадках. Реакція гальмування гемаглютинації (РГГА) заснована на блокаді, придушенні вірусів антитілами імунної сироватки, в результаті чого віруси втрачають властивість агглютинировать еритроцити. РГГА застосовують для діагностики багатьох вірусних хвороб, збудники яких (віруси грипу, кору, краснухи, кліщового енцефаліту та ін.) Можуть агглютинировать еритроцити різних тварин. Реакцію аглютинації для визначення груп крові застосовують для встановлення системи АВО за допомогою РА еритроцитів, використовуючи антитіла до груп крові А (II), В (III). Контролем служить сироватка, яка містить антитіл, тобто АВ (IV) групи крові, антигени, що містяться в еритроцитах груп А (II), В (III); негативний контроль не містить антигенів, тобто використовують еритроцити групи 0 (I). В реакції аглютинації для визначення резус-фактора використовують антирезусні сироватки (не менше двох різних серій). При наявності на мембрані досліджуваних еритроцитів резус-антигену відбувається аглютинація цих клітин. Контролем служать стандартні резус-позитивні і резус-негативні еритроцити всіх груп крові.

Реакцію аглютинації для визначення антирезусних антитіл (непряму реакцію Кумбса) застосовують у хворих при гемолізі. У деяких таких хворих виявляють антирезусні антитіла, які є неповними. Вони специфічно взаємодіють з резус-позитивними еритроцитами, але не викликають їх аглютинації. Наявність таких неповних антитіл визначають в непрямій реакції Кумбса. Для цього в систему антирезусні антитіла + резус-позитивні еритроцити додають антіглобуліновой сироватку (антитіла проти імуноглобулінів людини), що викликає аглютинацію еритроцитів. За допомогою реакції Кумбса діагностують: патологічні стани, пов'язані з внутрішньосудинним лизисом еритроцитів імунного генезу, наприклад гемолітичну хворобу новонароджених: еритроцити резус-позитивного плода з'єднуються з тими, які циркулюють в крові неповними антитілами до резус-фактору, які перейшли через плаценту від резус-негативної матері.

Реакція коагглютинации - різновид РА: клітини збудника визначають за допомогою стафілококів, попередньо оброблених імунною діагностичною сироваткою. Стафілококи, що містять білок, що має спорідненість до імуноглобулінів, неспецифически адсорбируют антимікробні антитіла, які потім взаємодіють активними центрами з відповідними мікробами, виділеними від хворих. В результаті коагглютинации утворюються пластівці, що складаються з стафілококів, антитіл діагностичної сироватки і визначається мікроба.

Схема постановки реакції аглютинації.