Лабораторна діагностика туляремії людей

Особливості лабораторної діагностики туляремії

Організм людини сприйнятливий до туляремії. У людини туляремія - гарячкове захворювання з відносно доброякісним перебігом, що не представляє небезпеки зараження для оточуючих. Летальність при туляремії вУкаіни нижче 0,5% (без лікування). Для діагностики туляремії у хворого цілком достатньо застосування двох реакцій, шкірної проби і реакції аглютинації. Інші імунологічні реакції технічно більш складні (наприклад, реакція зв'язування комплементу).

Виділення від хворого культури збудника є лише спеціально оснащеним лабораторіям і застосовуються в основному з дослідницькою метою. Для виявлення туляремійних бактерій в органах тварин і об'єктах зовнішнього середовища в лабораторній практиці найчастіше використовують бактеріологічні методи дослідження матеріалу. Гризунів, кровосисних членистоногих доставляють в лабораторію для дослідження з дотриманням запобіжних заходів, передбачених правилами роботи з особливо небезпечними інфекціями.

Бактеріологічний метод для діагностики захворювання у людини в порівнянні з біологічним методом малоефективний, так як в організмі хворої людини туляремійні мікроби міститися в убогому кількості. Для вирощування туляремійних бактерій використовують спеціальні середовища, так як на простих поживних середовищах (мясопептонном агарі, бульйоні) цей мікроб не росте, зазвичай застосовується згорнута желточная среда, рибно-глюкозо-цистиновий агар і агар з додаванням крові. При масивному обсеменении органів зростання культури туляремійних бактерій з'являється через 18-24 год у вигляді ніжного синього нальоту на поверхні середовища.

Бактериоскопия зважаючи на дуже дрібних розмірів туляремийного мікроба він може бути з вірогідністю виявлено в мазках-відбитках з патологічного матеріалу тільки при рясному обсеменении останнього. При виготовленні мазків-відбитків використовують забарвлення за Романовським-Гімза. Шляхом бактеріоскопії (в поєднанні з реакцією преципітації) може бути отриманий швидкий (через 2-3 год) позитивну відповідь при дослідженні доставлених гризунів. Однак він є лише попередніми, так як позитивні результати бактеріоскопічного дослідження повинні бути підтверджені виділенням культури.

Серологічні дослідження - з серологічних методів дослідження застосовують реакцію аглютинації за загальноприйнятою методикою з використанням туляремийного діагноста. Діагностичним вважається титр 1. 100 і вище. Більш чутливою є реакція непрямої гемаглютинації, що застосовується як для ранньої, так і для ретроспективної діагностики. В якості антигену використовують туляремійний еритроцитарний діагностикум.

Прискорений метод серологічної діагностики туляремії. Для цієї мети застосовують кровяно-крапельну реакцію на склі. В якості антигену використовують звичайний туляремійний діагностикумів. В позитивних випадках при наявності у хворого титру сироватки 1. 100 і вище аглютинація на склі настає негайно після змішування крові з антигеном. Для прискореної діагностики туляремії у людей може бути використана також мікросерореакція. Для її постановки на предметне скло завдають не краплю крові, а краплю сироватки крові обстежуваного хворого і до неї додають стільки ж антигену. Позитивна мікрореакція на склі може служити для попередньої орієнтації в діагнозі.

Алергічна реакція строго специфічна, у хворих на туляремію людей вона ставати позитивною при всіх хімічних формах туляремії і, як правило, випереджає реакцію аглютинації. Проба полягає у введенні під шкіру в область передпліччя, передньої поверхні 0,1 мл туляріна (суспензія вбитих туляремійних мікробів). Оцінку проби виробляють через 24, 48 і 72 ч. Проба є позитивною при появі набряку або інфільтрату. Гіперемія без набряку, зникаюча через добу, діагностичного значення не має. Внутрішньошкірної проби застосовують і для ретроспективної діагностики туляремії. Треба мати на увазі, що проба з тулярином буває позитивною у осіб, які зазнали щеплень туляремійной вакциною. Замість внутрішньошкірної проби користуються нашкірної пробою: нанесенням двох крапель антигену на долонну поверхню передпліччя з подальшими поверхневими насічками і легким втиранням антигену. В позитивних випадках через 24-36 год з'являються гіперемія і набряклість, що зберігаються 2-3 дні.

Біологічний метод є найчутливішим способом виявлення туляремійних бактерій в будь-якому досліджуваному матеріалі. Біологічний метод дослідження полягає в зараженні лабораторних тварин (морська свинка, біла миша) результатом бубонов, взятим до 14-20-го дня хвороби; зішкрібком з дна виразки, змішаним з фізіологічним розчином, отриманим до 8-12-го дня, виділенням кон'юнктиви, взятим до 15-17-го дня хвороби; кров'ю 5-6 мл, взятої до 6го дня хвороби. Досліджуваний матеріал вводять піддослідним тваринам підшкірно або внутрішньочеревного. Заражені тварини гинуть від туляремії в перебігу 4-14 днів. Шматочки печінки, селезінки, лімфатичного вузла і кров засівають на желточную середу для виділення збудника.