Кафедра мікробіології, вірусології та імунології УМКД, стоматологія
Казахський національний медичний університет ім. С.Д. Асфендіярова
Кафедра мікробіології, вірусології та імунології
Дисципліна - мікробіологія
Спеціальність. 051302 стоматологія
Обсяг навчальних годин 162 годин
Лекції - 9 годин
Практичні заняття - 45 годин
Самостійна робота студентів з викладачем (СРСП) - 54 години
Позааудиторних годин (СРС) - 54 години
Форма контролю - іспит
Обговорено на засіданні кафедри мікробіології, вірусології та імунології від
1.5 Структура методичних рекомендацій для самостійної роботи під керівництвом викладача.
Тема №1. «Цілі і завдання медичної мікробіології. Її значення в діяльності лікаря-стоматолога »
Мета: Метою даної лекції є формування у студентів знань про те, що вивчає дисципліна медична мікробіологія, якими користується методами дослідження і діагностики, профілактики та лікування інфекційних захворювань; дати поняття про мікроорганізми і їх класифікаціях, а також про значення мікробіології в діяльності лікаря-стоматолога.
Мікробіологія - наука, предметом вивчення якої є мікроорганізми, їх біологічні ознаки, систематика, екологія, взаємини з іншими організмами (людиною, рослинами, тваринами). Знання основ мікробіології, вірусології та імунології і вміння ними користуватися в практичній діяльності дозволить лікаря стоматолога:
своєчасно діагностувати патологічний процес / захворювання, провести грамотне обстеження пацієнта, призначити дієву терапію, ефективно проводити профілактику рецидивів, лікар-стоматолог повинен знати етіологію, патогенез і характер клінічного прояву мікробних уражень у порожнині рота. Крім того, глибоке знання характеру мікробних уражень необхідно лікаря-стоматолога, щоб вчасно вжити заходів біологічної безпеки. При наданні стоматологічної допомоги некваліфікований лікар, який порушує правила дезинфекційно-стерилізаційного режиму і біологічної безпеки, може заразити пацієнта і себе самого інфекційним захворюванням (сифіліс, туберкульоз, вірусний гепатит, ВІЛ-інфекція, герпес та ін.), Тим самим сприяючи поширенню інфекції серед населення .
враховувати порушення нормальної мікрофлори (дисбактеріозу), імунодефіцитних, аутоімунних і алергічних станів при проведенні лікування основного захворювання; долати проблеми імунологічної сумісності між матір'ю і плодом, реципієнтом і донором;
знати проблеми санітарної та екологічної мікробіології;
використовувати імунобіологічні і протимікробні препарати в профілактичній та лікувальній роботі.
Систематика - наука про різноманіття видів, пояснює положення видів у системі.
Класифікація - розподіл мікробів з подібними ознаками по групах (таксонам)
Таксон - одиниця класифікації: вид, рід, сімейство, порядок, клас, відділ, царство.
Патогенні, умовно-патогенні, непатогенні мікроби. Основні форми: коки, палички, спіралеподібні бактерії. Інші мікроорганізми: мікоплазми, актиноміцети, рикетсії, хламідії.
Ілюстративний матеріал: презентація в «Power Point» з фотографіями, схемами, таблицями, фільмами
Систематика - жүйелеу - taxonomy
Капсула - капсула - capsule
Контрольні питання (зворотний зв'язок)
Яке значення мікробіології в діяльності лікаря-стоматолога.
Принципи класифікації бактерій. Основні таксони.
Тема №2: «Основи морфології і фізіології мікроорганізмів»
Мета: Основною метою вивчення даної теми є формування у студентів знань про основні морфологічних особливостях еукаріот, прокаріот, вірусів і їх відмінностях, про фізіологію мікроорганізмів, про основні системах життєзабезпечення бакатерій, методах культивування, типів їх харчування, дихання, особливості росту і розмноження, а також метаболізмі бактерій.
Відмінні властивості клітин прокаріотів і еукаріотів
1-оболонка, що складається з капсули
капсулоподібної оболонки, ЦПМ і клітинної стінки (від їх складу залежать тинкторіальних властивості)
2-цитоплазма з включеннями, рибосомами
4-додаткові структури - капсула, мікрокапсула, слиз, суперечки, джгутики, війки (пили, фимбрии, мікроворсинки)
Капсулоподібної оболонка -ліпідно-полісахаридно освіту, порівняно неміцно пов'язане з поверхнею клітини, може виділятися в навколишнє середовище. Іноді покрита Екзополісахариди (вуглеводи), глюкан і Льова забезпечують прилипання бактерій до різних поверхонь, часто гладким (стрептококкі- зубна емаль, серцеві клапани)
Капсули: мікро- і макрокапсули. виявляють за методом Гисса-Іонне, легко відділяється від клітини струшуванням
Мікрокапсули прі електронно-мікроскопічному дослідженні у вигляді микрофибрилл з мукополісахаридів, які тісно прилягають до КС
Макрокапсули - при світловій мікроскопії виражений слизовий шар, що складається з полісахаридів і рідко з поліпетідов
1-захисна (від несприятливих умов середовища обітанія- фагоцитів, токсинів, бактеріофагів. Радіації, кисню)
2-адгезивная (сприяє «прилипання» до поверхні (рецепторам) клітини господаря
3 у деяких патогенні
4 у деяких антигенні (Ат проти капсули викликають її збільшення-реакція набухання капсули)
1-захисна (від несприятливих умов середовища обітанія- фагоцитів, токсинів, бактеріофагів. Радіації, кисню)
2-адгезивная (сприяє «прилипання» до поверхні (рецепторам) клітини господаря
3 у деяких патогенні
4 у деяких антигенні (Ат проти капсули викликають її збільшення-реакція набухання капсули)
-покриває всю поверхню клітини
-основа всіх кс бактерій - петідоглікан (муреин). відносно більше в грам (+) бактерій-частка муреіновой мережі приблизно в 40 шарів становить 30-70% сухої маси кс, в грам (-) всього 1-2 шари (10% сухої маси кс) - обеспечіваютрігідность і еластичність кс
-захищає від зовнішніх впливів
-через неї здійснюється транспор т поживних в-в і виділення метаболітів
-на її поверхні розташовуються рецептори (бактеріофагів, бактеріоцинів, хім.в -н)
-підтримує постійність внутрішнього середовища і витримує тиск зсередини (30 атм)
-сприймає барвники (визначають тинкторіальних властивості)
видалення кс призводить до лізису бактерій. або утворення протопластів і сферопластов. розрізняються за походженням і осмотичної стійкості
протопластіз грам (+) - бактерії, повністю позбавлені кс, наприклад під дією лізоциму, для підтримки сферичної форми потребують изотонической середовищі (в гіпо - і гиперсреде втрачають цілісність)
сферопласти з грам (-) - бактерії, позбавлені кс частково, (утворюють сферичну форму навіть не в изотонической середовищі - вони стійкі до різниці осмотичного тиску м / у внутрішньо-і позаклітинними відділами)
L- форми (названі на честь Інституту ім. Д. Лістера) - бактерії позбавлені кс, але здатні розмножуватися (спонтанно або індуковані).
-Бувають стабільні (не здатні до реверсії) і нестабільні (повертаються в початкові форми після видалення причинного фактора). -великі і дрібні кулі (незалежно від вихідної форми клітини (палички, коки) L-форми цих бактерій морфологічно невиразні)
3 основні форми:
Метаболізм бактерій - об'єднує два процеси:
Катаболізм (дисиміляція або енергетичний метаболізм) - розщеплення різних субстратів для отримання енергії
і анаболізм (асиміляція або пластичний метаболізм) - синтез високомолекулярних сполук, для утворення клітинних структур.
Зростання - координоване відтворення всіх клітинних компонентів і структур, що веде до збільшення маси клітини.
Розмноження - збільшення числа клітин в популяції.
Основні типи факторів росту:
речовини, присутність яких обов'язково для зростання бактерій;
речовини, відсутність яких не викликає повної зупинки росту культури;
речовини, безпосередньо синтезовані бактеріями і додавання яких в середу необов'язково.
Динаміка розмноження бактерій
В ході розмноження паралельно йде наростання і відмирання бактерій
1.Ісходние (1-2 години) - число бактеріальних клітин не збільшується
2.задержкі розмноження (період фізіологічного пристосування, що включає індукцію нових ферментів, синтез і збірку рибосом) - лаг фаза. Початок інтенсивного росту клітин, але швидкість ділення невисока
3.експоненціальная (5-6 година) - лог фаза або логарифмічна. Максимальна швидкість розмноження клітин і збільшення числа бактеріальної популяції в геометричній прогресії. Час генерації залежить від виду мікроба, наприклад: для псевдоманад-14 хв, для туберкульозної палички-24 годину.
4.отріцательного прискорення (2 години) - менша активність бактеріальних клітин і подовження періоду генерації за рахунок виснаження живильного середовища, накопичення продуктів метаболізму і дефіциту О2.
5.стаціонарная (2 години) - рівновага між кількістю загиблих і знову утворюються клітин в стані спокою. Спороутворюючі бактерії (бацили, клостридії) здатні переходити в стадію споруляции.
6.ускоренной загибелі (3 години)
7.логаріфміческой загибелі (3 години)
8.фаза зменшення швидкості відмирання - на щільних поживних середовищах виростають колонії мікробів. Проводять оцінку зростання бактерій (суха вага, кількість в 1 мл), мікроскопічне вивчення, колір, здатність поглинати світло і.т.д.
Дихання бактерій - це процес отримання енергії. Облігатні аероби, облігатні анаероби, факультативні анаероби, мікроаерофіли (зростання при підвищеному вмісті углек. Газу і низькому вмісті кисню), аеротолерантнимі (виживають, але не ростуть протягом короткого періоду часу в присутності атмосферного кисню).
механізм анаеробіозу
Для анаеробів О2 є отрутою, так як при дії кисню утворюється Н2 О2 (перекис), яка і губить клітину. Загибель настає через відсутність у анаеробів каталази і супероксіддісмутази- ферментів, що руйнують Н2 О2 і супероксид -аніон)
Анаероби (мікроаерофіли) можна вирощувати в аеробних умовах, якщо додати в середу вирощування відновники (акцептори кисню) - глюкозу, цистеїн, сукцинат Na та ін.
способи вирощування анаеробів.
- посів в середу Кітта-Тароцці
-посів уколом в стовпчик напіврідкого агару
-посів на спеціальні середовища і вирощування в анаеростатах
-посів за методом віньялл-вейона в агар в трубках
-біологічний метод Фортнера
-хімічний (в ексикаторі з пірогалолу)
Ступінь анаеробних і аеробних мікроорганізмів виражається величиною окисно-відновного (редокс) потенціалу. rH2 (Eh)
Середа насичена киснем - rH2 = 41
Середа насичена воднем - rH2 = 0
Облігатні анаероби- rH2 = 12 (3-5 розмножити)
Облігатні аероби- rH2 = 14-20
Факультатівние- rH2 = 0-20
rH2 - це міра здатності розчину віддавати або приймати електрони, тобто окислюватися або відновлюватися. Вимірюється в вольтах.
Ферменти бактерій. Гідролази, десмолази, оксидоредуктаз, трансферази, ліази, ізомерази, лігази. Екзоферменти (виділяються в навколишнє середовище). Ендоферменти (локалізуються в клітці). Конститутивні - синтезуються в клітці без наявності певного субстрату. Індуцібільние - концентрація їх зростає при наявності певного субстрату.