Бактеріологічний (культуральний) метод - це

Бактеріологічний (культуральний) метод Бактеріологічний (культуральний) метод

сукупність методик штучного культивування мікроорганізмів на поживних середовищах з метою їх ідентифікації при встановленні д-за інфекційного захворювання або іншого викликаного мікробами процесу і визначення ряду фізіологічних св-в до-ри з ін. цілями, напр. при виборі хіміотерапевтичного препарату. Сучасні методи вивчення більшості біол. св-в бактерій можливі тільки при наявності чистої к-ри (див.). Контамінація к-ри ін. Виглядом мікробів, як правило, веде до спотворення результатів і неправильного висновку. Тому першим завданням Б.м. є отримання чистого к-ри будь-якого виду (вару) з мікробної асоціації та попередження контамінації сторонньої мікрофлорою матеріалу для дослідження і мікробної к-ри на всіх етапах дослідження. Це можливо при заборі матеріалу в стерильних умовах в стерильну посуд, посіві матеріалу в стерильні середовища стерильним інструментом, попередженні потрапляння мікробів з повітря в процесі доставки, зберігання і інкубації матеріалу і засіяних поживних середовищ. Друге завдання Б.м. - ідентифікація мікробів (див.) Виділеної чистої к-ри, третя - визначення додаткових св-в, напр. чутливості до антибіотиків, вірулентності. Етапи Б.м. 1) забір матеріалу (див. Матеріали для дослідження) і його доставка в бактеріол. лабораторію; 2) мікроскопія досл. матеріалу (див. Бактеріоскопічний метод). Цей етап часто не виконується, хоча, незважаючи на меншу чутливість, попередня мікроскопія в ряді випадків дає орієнтовні відомості про збудника і дозволяє вибрати необхідні для посіву середовища; 3) обробка досл. матеріалу фіз. або хім. факторами з метою видалення або зменшення сторонньої мікрофлори. Цей захід застосовується, напр. при дослідженні мокротиння, виділення кислотостійких і спороутворюючих мікробів; 4) посів досл. матеріалу (див. Посіви бактеріологічні) на поживні середовища для отримання ізольованих колоній; 5) інкубація засіяних поживних середовищ. Терміни і температура інкубації залежать від передбачуваної видової приналежності до-ри. Зазвичай посіви витримують в термостаті при 37 ° С 1-2 дня. Якщо зростання відсутня, термін інкубації може бути продовжений ще на 2 - 3 дні. При більш тривалій інкубації необхідно попередити висихання середовища, для чого посіви поміщають в ексикатор з водою або пробки пробірок заливають парафіном; 6) дослідження колоній (див.). Для вивчення вибирають однорідні ізольовані колонії, розташовані далеко від країв чашки і по штриху петлі, оточують їх рисою, нумерують. Якщо дослідження ведеться ненаправлено (поліетіологічний процес та ін.), То на підставі результатів візуального огляду вибирають по 2 - 3 колонії всіх наявних на чашці типів і роблять з них мазки; 7) пересівши з обраних колоній на середовища збагачення. Для цього із залишку колонії, в мазку к-рій виявлені однорідні за формою і забарвленням бактерії, петлею, намагаючись не зачепити сусідні колонії, забирають частину к-ри і засівають на скошений в пробірці МПА або спеціальне середовище штрихом; 8) інкубація посівів в термостаті до появи суцільного зростання (зазвичай 1 -2 дня); 9) визначення чистоти виросла на скошених середовищах к-ри шляхом макроскопічного огляду зростання і мікроскопії мазка з нього; 10) ідентифікація виділеної чистої к-ри і в разі необхідності (на вимогу клініциста, епідеміолога) визначення різних біол. св-в; 11) висновок про видову приналежність виділеного к-ри і її св-вах. Висновок дається на офіційному бланку з посиланням на номер, під крим ця к-ра занесена в лабораторний журнал. Б.м. є основним в д-ке більшості бактерій. інфекцій. Він, як правило, має високу чутливість, що дозволяє виділити з, досл. матеріалу чисту к-ру, навіть якщо в посівної дозі матеріалу містилася кілька десятків особин. Для Б.м. характерна висока специфічність. Виділення того чи іншого виду бактерій з патологічного матеріалу при дотриманні ряду умов (див. Збудник хвороби) надійно встановлює етіологію патологічного процесу. Виняток становлять умовно-патогенні аутохтонние для того чи іншого біотопу бактерії, для визначення етіоло. ролі яких брало потрібні спеціальні критерії, а також розмежування носійства і захворювання (напр. дифтерійне носійство при стрептококової ангіні). Цінність Б.м. полягає також у тому, що з його допомогою можуть бути встановлені св-ва к-ри, необхідні для призначення хіміо- і серотерапії, виявлення джерела інфекції та механізмів передачі збудника, вибору протиепідемічних заходів. Нарешті, Б.м. відноситься до ранніх методам д-ки. Недоліки Б. м. - небезпека інфікування, складність, трудомісткість, тривалість. Достовірні дані про склад мікрофлори і її св-вах можна отримати тільки при дослідженні вибірки з 3 -10 до-р.

(Джерело: «Словник термінів мікробіології»)