Сучасні методи лабораторної діагностики сифілісу
Їм-му-но-фер-мент-ний ана-ліз. Сре-ді мно-же-ст-ва се-ро-ло-гі чого ских ме-то-дів од-ним з най-бо-леї пер-спек-тив-них для раз-ра-бот-ки ді-аг-но-сті-че-ських тест-сис-тем на си-фі-лисиць яв-ля-ет-ся їм-му-но-фер-мент-ний ана-ліз (ІФА). В на-стоячи-ний ча-ма най-біль-шиї рас-про-стра-ні-ня по-лу-чіл НЕ-пря-мій ва-ри-ант ІФА, на за-клю-чи-тель-ном ця-пе ко-то-ро-го ис-поль-зу-ють-ся ан-Ті-Ві-до-ші АТ до їм-му-ніг-ло-бу-ли-нам че-ло-ве-ка , кон'-ю-ги-ро-ван-ні з пе-рок-сі-да-зой хре-на або дру-ги-ми фер-мент-ни-ми мар-ке-ра-ми.
Ме-тод їм-му-Ноб-ло-тин-га. Од-ним з со-ча-мен-них ме-то-дів ді-аг-но-сті-ки си-фі-ли-са яв-ля-ет-ся їм-му-Ноб-ло-тинг (Western blot) для оп-ре-де-ле-ня IgG чи-бо IgM. При про-ве-де-ванні їм-му-Ноб-ло-тин-га T.pallidum під-вер-га-ють-ся елек-тро-фо-ре-зу в гра-ді-ен-ті кон- цін-тра-ції до-де-цил-суль-фа-та на-трия, в ре-зуль-та-ті че-го про-ис-хо-дить раз-де-ле-ня бел-ко-вих їм-му-но-де-тер-ми-нант на ніт-ро-цел-лю-ло-зе. За-тим про-з-під-дит-ся об-ра-бот-ка раз-де-льон-них "то-чек" (blots) ис-сле-дуе-мій си-по-рот-кою і ан -ти-ті-ла-ми до IgG чи-бо IgM, ме-чен-ни-ми фер-мен-та-ми чи-бо ра-діо-ак-тив-ни-ми ве ще ст-ва -ми. IgG - їм-му-Ноб-ло-тинг по чув-ст-ві-тель але сті і спе-ци-фіч-но-сті по-до-бен РИФ-абс. При-ме-ні-ня ан-ти-IgM спе-ци-фі-чого ско го кон'-ю-га-ту (IgM Western blot) при про-ве-де-ванні їм-му-Ноб-ло -Тінь-га мо-же слу-жити ді-аг-но-сті-че-ським тес-те для вро-ж-ден-но-го сі-фі-ли-са, бо-леї чув-ст-ві тель-ним по срав-ні-нию з FTA - ABS 19S IgM (чув-ст-ві-тель-ність і спе-ци-фіч-ність 83 і 90% з-від-вет-ст-вен-но) .
По-лі-ме-раз-ва ціп-ва ре-ак-ція (ПЛР) при-ме-ня-ет-ся для оп-ре-де-ле-ня спе-ци-фі-че-ських по- сле-до-ва-тель-но-стей ДНК. Ме-тод за-клю-ча ет ся в мно-го-крат-ном збіль-ли-че-ванні (ам-пли-фі-ка-ції) ко-ли-че-ст-ва ДНК ді- аг-но-сті-РУЕ-мо-го мік-ро-ор-га-низ-ма. Раз-ра-бот-ка ва-ри-ан-тов ПЛР для ді-аг-но-сті-ки си-фі-ли-са обу-слів-ли-ва-ет-ся НЕ-дос-та-точ -но-стю стан-дарт-них тес-тів при ран-ньому се-ро-ні-га-тив-ном, вро-ж-Ден-ном сі-фі-ли-се і ней-ро-сі-фі -Чи-се. Об-на-ру-же-ня T.pallidum з по-мо-гою ПЛР зна-чи-тель-но об-ліг-ча ет ся ви-ра-дружин-ним ге-ні-ти-че ським кон-сер-ва-Тіз-мом і прак-ти-че-ським від-сут-ст-ві-ням ре-ком-бі-на-цій та-мет-ж-ду під-ві-да- ми. Біль-шим дос-то-ін-ст-вом ПЛР яв-ля-ет-ся мож-ли-ність ав-то-ма-ти-за-ції ре-ак-ції пу-тём за-дан-но го цик-ли-чого ско го тим-пе-ра-тур-но-го ре-жи-ма. При-ме-ні-ня ПЛР мо-же мати біль-ШОЕ зна-че-ня при ді-аг-но-сті-ке вро-ж-Ден-но-го сі-фі-ли-са (пас-сів -ний транс-пла-цен-тар-ний пе-ре-ніс ан-ти-тіл не впливав-ет на ре-зуль-та-ти тес-ту), ней-ро-сі-фі-ли-са ( чув-ст-ві-тель-ність су ще ст-ву-ють тес-тів око-ло 50%), пер-вич-но-го се-ро-ні-га-тив-но-го (в на-стоячи-ний ча-ма од-ним з кри-ті-ри-їв яв-ля-ет-ся пря-мій мік-ро-ско-пі-че-ське об-на-ру-же-ня тре -по-ньому), а так-же при ді-аг-но-сті-ке сі-фі-ли-са у ВІЛ-ін-фі-ци-ро-ван-них.
Дослідження спинномозкової рідини
Дан-ні ис-сле-до-ва-ня спін-но-моз-го-вої жид-ко-сти (чи-к-ть-ра) ис-поль-зу-ють в сле-ду-ю-чих слу-ча-ях: для оп-ре-де-ле-ня по-ра-же-ня си-фі-ли-сом нер-в-си-с-те-ми; як кри-ті-рий ка-че-ст-ва ле-че-ня в осіб з па-то-ло-гі чого з-ки-ми через ме-ні-ня-ми в ли- к-ть-ре до ле-че-ня; як один з кри-ті-ри-їв з-ле-чен-но-сті біль-но-го.
В клі-ні-чо-с-кою ла-бо-ра-то-рії ис-сле-ду-ють ци-тоз, со-дер-жа-ня бел-ка, гло-бу-ли-но-ші ре-ак-ції Пан-ді і Нон-ні-Апель-ту. В се-ро-ло-гі чого з-кою ла-бо-ра-то-рії в-во-дять ре-ак-цію Вас-сер-ма-на з тре-ма раз-ве-де- ні-я-ми чи-к-ть-ра, ре-ак-цію Лан-ге з кол-ло-ід-ним зо-ло-те, РІТ, РІФ10 і РІФц (ре-ак-ція їм-му- Ноф-лю-о-рес-цен-ції з мета-ним чи-к-ть-ром).
Мі-ні-маль-ні па-то-ло-гі чого з-кі через ме-ні-ня в спін-но-моз-го-вої жид-ко-сти сле-ду-ю-щие: со-дер-жа-ня бел-ка, на-чи-ва з 0,4 ‰; ци-тоз - 8 кле-ток в 1 мм 3; гло-бу-ли-но-ші ре-ак-ції (ре-ак-ція Нон-ні-Апель-ту ++, ре-ак-ція Пан-ді +++); ре-ак-ція Лан-ге - біль-ше двох дво-ек в циф-ро-вом зна-че-ванні; по-ло-жи-тель-ва ре-ак-ція Вас-сер-ма-на. За-ка-за-ті-ви-ше- вка-зан-них, так-же бу-ду-чи з-ли-ро-ван-ни-ми, сві-де-тель-ст-ву-ють про ви-ра-дружин-них па-то-ло-гі чого з-ких через ме-ні-ні-ях в спін-но-моз-го-вої жид-ко-сти. Па-то-ло-гі чого з-кою вва-та-ет-ся так-же та-кая спін-но-моз-го-вая жид-кістка, в ко-то-рій НЕ-як-ко по-ка-за-ті-лей через ме-ні-ни-від-вет-ст-вен-но дан-ним мі-ні-маль-ний па-то-ло-гии, а ре-ак ція Вас-сер-ма-на по-ло-жи-тель-ва.
Для про-з-на-че-ня по зи тив-но-сті гло-бу-ли-но-вих ре-ак-цій і РМ при-ме-ня-ет-ся сі-с-те- ма че-ти-рьох плю-сов: ре-з-ко по ло жи-тель-ний ре-зуль-тат (4+), по-ло-жи-тель-ний (3+), сла- бо-по-ло-жи-тель-ний (2+), з-м-ні-тель-ний (1+).
Іс-поль-зо-ва-ня РИФ також це-ле-со-про-раз-но при лі-к-ть-ро-ді-аг-но-сті-ке сі-фі-ли-са. Осо-бен-но ви-со-ко-чув-ст-ві-Телень і спе-ци-фі-ч-ен тест з мета-ним чи-к-ть-ром (РІФ-ц). РІТ зі спин-но-моз-го-вої жид-ко-стю по по-ста-нов-ке, ре-ги-ст-ра-ції і оціню-ке ре-зуль-та-тов ана ло гі -год-на та-ко-вий при ис-сле-до-ва-ванні си-по-рот-ки кро-ві. При-ме-ні-ня РИФ і РІТ рас-ши-ря-ет віз-мо-ж-но-сті оп-ре-де-ле-ня си-фі-ли-ти-че-с-ко-го по-ра-же-ня нер-в-си-с-те-ми.