Лабораторна діагностика сибірки 1

Лабораторна діагностика сибірки. Виявлення сибірської виразки

Лабораторна діагностика сибірки в першу чергу передбачає виділення збудника. Основна схема лабораторного дослідження патологічного матеріалу включає: мікроскопію забарвленого мазка, посів на поживні середовища, зараження лабораторних тварин.

Як сигнальних використовують люмінесцентно-серологічний метод. пробу зі специфічним бактериофагом, методи виявлення капсулообразованія на середовищі ГКІ або за допомогою прискореної біопроб (внутрішньоочеревинному зараженням мишей).

Для швидкої диференціації колоній сибиреязвенного мікроба від колоній спороутворюючих сапрофітів при дослідженні як матеріалу від хворого, так і об'єктів зовнішнього середовища використовується диференційно-діагностичне середовище виробництва Бердичівського НІІВС. Принцип роботи з середовищем заснований на виявленні фосфатазной активності спороутворюючих сапрофітів. Сибірковий мікроб фосфатазной активністю не володіє. Первинні посіви або пересівання підозрілих культур инкубируют на цьому середовищі при 37 ± 1 ° С протягом 18-24 год. При наявності росту в кришку чашки Петрі вносять 1-2 мл 25% водного розчину аміаку.

Чашку (кришкою вниз) витримують при 20 ± 2 ° С протягом 1 хв, після чого проводять облік тесту. Колонії сапрофитов фарбуються в рожевий колір, колонії сибиреязвенного мікроба залишаються безбарвними.

З метою виділення чистої культури проводять посів на МПА і МПБ. Після підрощування виділені культури ідентифікують на підставі найбільш характерних для збудника сибірської виразки ознак: ставлять проби з сибірковим бактериофагом, пеніциліном (тест «перлового намиста»), виявляють відсутність гемолізу, летіціназной і фосфатазной активності, оцінюють здатність до Капсулоутворення.
Зараження лабораторних тварин має на меті як виділення чистої культури, так і оцінку її вірулентності (на підставі визначення ДСЛ і ЛД50).

Лабораторна робота по виділенню і диференціації палички сибірської виразки повинна проводитися в особливих режимних умовах, що попереджають можливість інфікування персоналу та обсіменіння навколишнього середовища.

В якості діагностичного тесту використовується також шкірна алергічна проба з алергеном-антраксином. Внутрішкірна ін'єкція антраксином в разі наявності у людини захворювання на сибірку спричиняє розвиток гіперемії і інфільтрату. Реакцію з антраксином ставлять на внутрішній поверхні верхньої третини передпліччя. Антраксином вводять з дотриманням правил асептики строго під шкіру в дозі 0,1 мл. У шкіру іншого передпліччя в якості контролю вводять в тій же дозі іншим шприцом стерильний 0,9% розчин натрію хлориду. Облік реакції проводять через 24 і 48 ч відповідно до інструкцією з застосуванню препарату.

Позитивну антраксіновую пробу не приймають до уваги у осіб, вакцинованих проти сибірської виразки протягом попередніх 12 місяців, а також у осіб, в минулому перехворіли на сибірку.

Діагноз сибірки у людини вважається встановленим при наявності відповідної клінічної картини, епідеміологічного анамнезу, підтверджених одним з перерахованих способів: виділенням збудника з патологічного матеріалу; виявленням його в передбачуваному джерелі або факторі передачі; позитивною пробою з антраксином.