Фек-м (фотоелектроколориметр м) - агроархів сільськогосподарські матеріали

При Фотоколориметричні визначенні враховують зміну інтенсивності світла, що пройшло через розчин. ФЕК-М використовується при визначенні активності деяких ферментів, під впливом яких відбувається зміна (фарбування) субстрату. При цьому порівнювати ні забарвлення двох розчинів, а їх екстинкцію - величину, що характеризує ослаблення світла при проходженні його через деяку середу, обумовлене поглинанням або адсорбцією і розсіюванням світла дрібними частками або молекулами самого середовища. Це робиться за допомогою ряду пристосувань і пристроїв.
Побудова калібрувальних кривих. При Фотоколориметричні визначеннях користуються калібрувальними кривими, що виражають залежність оптичної щільності і пропускання світла від концентрації розчину. Визначають оптичну щільність досліджуваного розчину і по калібрувальної кривої знаходять відповідні їм концентрації.
Серію стандартних розчинів досліджуваної речовини готують з одного вихідного розчину відомої концентрації. Для кожного розчину знаходять величину оптичної щільності Д. компенсує рідиною (контролем) у цих визначеннях є розчинник. Вимірювання Д виробляються при відповідному світофільтрі в кюветах певної довжини (10-30 мм).
Отримані результати зображуються графічно. На осі абсцис відкладають концентрацію розчинів, на осі ординат - відповідні їм значення оптичної щільності.
Викреслюються криві, якими надалі користуються для визначення концентрації досліджуваної речовини в розчині.
Прилад працює за принципом рівняння двох світлових потоків в результаті зміни ширини щілини, через яку проходить один світловий потік; на шляху другого поміщаються клини, які поглинають частину світу (рис. 18). Світлові пучки від лампи J1, відбившись від дзеркал З1і З2 проводять через світлофільтри С1 і С2, кювети А1 і А2 і потрапляють на фотоелементи Ф1 і Ф2, включені з гальванометром Г з диференціальної схемою, т. Е. Так, що при рівності інтенсивності світлових пучків , падаючих на фотоелементи, стрілка гальванометра стоїть на нулі. Інтенсивність правого світлового потоку регулюється зміною ширини щілини діафрагми Д, яка пов'язана з двома барабанами, що знаходяться на одній осі. Обертанням барабанів змінюють ширину щілини. Інтенсивність ліво », го потоку можна змінити за допомогою кругових фотометричних клинів К.

У корпусі 1 змонтовані основні частини приладу (рис. 19): освітлювач, оптична система, власники кювет, фотометричні клини, селенові фотоелементи, стрілочний гальванометр і лупа для розглядання шкали гальванометра, вимірювальна діафрагма з відліковими барабанами і вузол кольорових світлофільтрів (рис. 20) .

Освітлювач складається з лампи розжарювання з патроном. Тримачі кювет встановлені на шляху проходження світлових пучків. Кожен власник має три гнізда для установки в них кювет. Тримачі кювет можуть повертатися навколо осі і фіксуватися в трьох положеннях упорами, розташованими під кутом 120 °.
Прилад має чотири світлофільтру: безбарвний, зелений, синій, червоний. Вони позначені цифрами 1, 2, 3, 4 на рукоятці 15, що служить для установки фільтрів.
Інтенсивність лівого потоку змінюють за допомогою двох фотометричних клинів; один з них призначений для грубої настройки, інший - для точної. Клин грубої настройки приводиться в обертання за допомогою рукоятки 6, а клин точної настройки - рукоятки 7.
Спостереження за стрілкою гальванометра проводиться через лупу 10, освітлювану лампою 11. Для перемикання гальванометра на більшу чи меншу чутливість служить рукоятка 16. Цифри 0, 1, 2 вказують, на яку чутливість включений гальванометр: 1 - на малу, 2 - на велику чутливість, 0 - гальванометр вимкнений.
Інтенсивність правого потоку променів змінюється щілинний діафрагмою - прямокутником, дві бічні грані якого можуть переміщатися назустріч один одному, зменшуючи ширину щілини від максимального значення до нуля.
Вимірювання ширини щілини виробляють обертанням відлікових барабанів, поміщених на одній осі. На кожному барабані нанесені дві шкали 13 - шкала коефіцієнта пропускання і шкала оптичної щільності. На лівому барабані 12 шкала світлопропускання нанесена таким чином, що 100% коефіцієнта світлопропускання відповідає максимальному розкриттю щілинний діафрагми, а 0% - повного її закриття. Шкала коефіцієнта світлопропускання рівномірна. На правому барабані шкала нанесена інакше: 100% коефіцієнта світлопропускання відповідає мінімальному розкриття щілини, а 30% - максимального. Шкала коефіцієнта пропускання нерівномірна і тому при отсчетах в області вимірювання 70 30% дає більшу точність, ніж шкала лівого барабана. Відлік за шкалою виробляють через вікна 13.
До приладу додаються два ящика з набором кювет (кювети мають відстань між робочими гранями 1, 3, 5, 10, 20, 30, 50 мм).
Перед початком роботи необхідно арретіровать гальванометр і поставити рукоятку 8 гальванометра і барабани відліків на нуль. Рукоятку гальванометра переводять в положення «відкрито». За допомогою рукоятки 8 встановлюють гальванометр на нуль. Включають прилад в мережу. Закривають світлові пучки шторками 3, через 15 хв після включення перевіряють, чи варто стрілка гальванометра на нулі. Щоб уникнути поломки гальванометра при положенні рукоятки 9 «закрито» не можна обертати рукоятку 8. Відкривають шторки на шляху променів, ставлять потрібний фільтр. Через 20 хв після початку освітлення фотоелементи (шторки відкриті) починають роботу. У перші хвилини після включення приладу в мережу він дає недостатньо стабільні результати. При нетривалих перервах в роботі не слід виключати прилад і закривати світлові пучки.
Визначення можна проводити двома способами.
Перший спосіб. На шляху правого пучка променів світла поміщають кювету з досліджуваним розчином, на шляху лівого - кювету (тієї ж робочої довжини) з розчинником. Прилад закривають кришкою 2.
Поєднують нуль шкали оптичної щільності лівого барабана (100% за шкалою світлопропускання) з нерухомою межею вікна 13. Щілинна діафрагма має при цьому максимальну ширину. Рукоятку 16 гальванометра переводять в положення 1, т. Е. На малу чутливість. Обертанням рукоятки 6 клина грубої настройки стрілку гальванометра встановлюють на нуль. Потім переводять рукоятку гальванометра на велику чутливість (положення 2) і, обертаючи рукоятку 7 клина точної настройки, знову встановлюють стрілку гальванометра на нуль.
Після цього рукоятку 16 гальванометра, переводять на нуль. Поворотом рукоятки 4 тримачі 5 на шляху правого пучка світла поміщають кювету з розчинником, переводять рукоятку гальванометра 16 в положення 1 і обертанням вимірювальних барабанів стрілку гальванометра знову встановлюють на нуль. Потім переводять рукоятку в положення 2 і остаточно встановлюють стрілку гальванометра на нуль. Величина оптичної щільності розчину відраховується по лівому барабану.
Вимірювання слід повторити кілька разів, підбиваючи стрілку гальванометра до нуля то зліва, то справа. З отриманих відліків обчислюють середнє значення оптичної щільності.
Другий спосіб. На шляху правого і лівого пучків світла поміщають кювети з розчинником. Поєднують нуль шкали оптичної щільності правого барабана з нерухомою межею вікна 13. Щілинна діафрагма має при цьому мінімальну ширину. Обертанням кругових фотометричних клинів встановлюють стрілку гальванометра на нуль. Потім на шляху правого пучка світла поміщаються кювети з досліджуваним розчином. Обертанням вимірювальних барабанів збільшують ширину щілинний діафрагми і встановлюють стрілку гальванометра знову на нуль. Величина оптичної щільності відраховується по правому барабану.
При будь-якому способі роботи завжди слід строго дотримуватися вищеописаного порядку: роботу починають при включенні гальванометра на малу чутливість і після рівняння світлових потоків переходять на велику.
Обраного способу вимірювання слід дотримуватися протягом всієї роботи з даною речовиною.
Після закінчення роботи рукоятку гальванометра ставлять на нуль, барабани відліків також встановлюють на нуль і аретира гальванометр. Вимикають прилад.
Примітки: 1. З оптичних деталей (лампи, дзеркала, світлофільтри) пил знімається за допомогою м'якої серветки. Забруднення оптичних деталей призводить до зниження чутливості приладу.
2. Кювети рекомендується закривати кришками, що є обов'язковим при роботі з паруючими рідинами (соляна кислота і ін.).