Доповідь - пристрій мікробіологічної лабораторії і правила роботи в ній
Внесення мікроорганізмів в стерильне середовище називається посівом, або инокуляцией. Посів мікроорганізмів вимагає дотримання певних правил, які необхідно виконувати, щоб оберегти досліджувану культуру від забруднення сторонніми мікроорганізмами. Перед посівом слід ретельно надписати на пробірці (колбі або чашці Петрі) назва мікроорганізму і дату посіву.
Клітини мікроорганізмів для посіву або приготування препаратів беруть бактеріологічною петлею або голкою (рис. 2.3), якщо мікроорганізми вирощені на щільному середовищі. У тому випадку, коли мікроорганізми вирощені в рідкому поживному середовищі, краще користуватися не петлею, а стерильною піпеткою. Бактеріологічні петлі та голки роблять, використовуючи тонкий дріт з вольфраму або ніхрому, яку закріплюють в металевому або скляному тримачі. Діаметр бактеріологічної петлі - 4 - 5 мм.
Бактеріологічну петлю (голку) перед взяттям клітин мікроорганізмів стерилізують. Для цього дріт розжарюють до червоного в полум'я пальника і одночасно обпалюють примикає до петлі частина держателя, яку будуть вводити всередину посудини, що містить мікроорганізми. Петлю рекомендується тримати в полум'я пальника майже вертикально, щоб дріт був рівномірно розпечена на всьому протязі. При прожаренні необхідно пам'ятати, що найвища температура розвивається у верхній і периферичної частинах полум'я (рис. 2.4), тому не слід опускати петлю безпосередньо до пальника. Відразу ж після стерилізації петлю (голку) вводять в посудину з мікроорганізмами. Щоб не пошкодити клітини мікроорганізмів, петлю (голку) спочатку охолоджують, торкаючись нею до внутрішньої поверхні судини або до живильному середовищі, вільної від клітин мікроорганізмів, і тільки після цього захоплюють невелику кількість мікробної маси.
приготування препаратів
Препарати готують, як правило, на предметних стеклах, товщина яких не повинна перевищувати 1,2-1,4 мм. Більш товсті скла не дозволяють отримати чітке зображення країв діафрагми освітлювача в площині препарату, так як воно виявляється в товщі скла, а це порушує фокусування конденсора і різко знижує чіткість зображення. Товсті предметні скельця неприпустимі при роботі з іммерсійним об'єктивом, коли необхідно повністю використовувати числову апертуру системи.
Суттєвим моментом є підготовка поверхні предметних стекол, що особливо важливо при виготовленні фіксованих препаратів. Поверхня скла повинна бути ретельно очищена і знежирена, щоб крапля рідини рівномірно розпливалася по склу, а не збиралася в опуклі, повільно висихають крапельки. Найбільш надійний спосіб знежирення -Обробка стекол хромової сумішшю з наступним споласкиванием водою і спиртом. У повсякденній роботі, однак, цілком достатньо буває ретельно натерти сухе скло милом, після чого витерти його чистою бавовняною серветкою. Гарне знежирення досягається протиранням вимитих і висушених стекол ватою, змоченою ефіром (після цього промивання водою не потрібно), або обпаленням поверхні стекол в полум'я пальника (жир при цьому згоряє). Забороняється кип'ятіння стекол в розчинах лугів, в тому числі мийних засобах, а також тривале витримування стекол в таких розчинах, так як луги роз'їдають скло, роблячи його поверхню матовою. Зберігати чисті знежирені скла можна в сухому стані або в етанолі.
Покривні скла, застосовувані для приготування препаратів мікроорганізмів, також повинні бути ретельно вимиті і висушені. Товщина покривних стекол не повинна перевищувати 0,15 - 0,17 мм. Більш товсті скла різко погіршують якість одержуваного зображення.
Препарати живих клітин мікроорганізмів
Для вивчення живих клітин мікроорганізмів застосовують препарати «роздавлена крапля», «висить крапля», «відбиток», «агарові плівка» ( «микрокультура»). Препарати живих клітин розглядають з «сухими системами» мікроскопа. Препарати, робота з якими закінчена, перш ніж вимити, витримують в дезинфицирующем розчині.
і т.д.