Виготовлення гістологічних препаратів

Виготовлення зрізів здійснюється шляхом різання блоків, залитих в парафінові середовища. Виготовлення зрізів методом заморозки проводиться виключно при необхідності проведення забарвлень, які використовуються тільки на заморожених зрізах. Целлоідіновий метод заливки є кращим тільки при дослідженні кісткової тканини і міокарда.

Сучасні методики проведення дозволяють отримувати препарати вже через кілька годин після завершення фіксації матеріалу.

Наприклад, прискорену спирто - Хлороформний проводку виробляють за такою схемою:

Всі компоненти батареї для проводки повинні знаходитися в термостаті при + 60 ° С.

1. Вирізаний матеріал, що знаходиться в розчині формаліну, без промивання поміщають в 1-й спирт 50 ° і витримують в термостаті 20 хв.
2. Матеріал переносять у 2-й спирт 70 ° і витримують в термостаті 20хв.
3. Матеріал переносять в 3-й спирт 80 ° і витримують в термостаті 20хв.
4. Матеріал ретельно промокають і переносять в 4-й спирт 96 ° і витримують в термостаті 20хв.
5. Матеріал переносять в суміш спирт 96 ° - хлороформ у співвідношенні 1: 1 і витримують в термостаті 20хв.
6. Віджавши шматочки, матеріал переносять в хлороформ і витримують в термостаті 20хв.
7. Матеріал переносять в «парафінову кашу» (суміш парафіну з хлороформом) і витримують в термостаті 20хв.
8. Матеріал переносять в парафін 1 і витримують в термостаті 20хв.
9. Матеріал переносять в парафін 2 і витримують в термостаті 20хв.
10. Матеріал переносять в парафін 3 і витримують в термостаті 20хв.
11. Заливка в блоки, після чого препарати виготовляють звичайним способом.

Прискорена проводка вимагає точного дотримання терміну переносу зразків з одного розчину в інший. Для його забезпечення доцільно використовувати автоматичний процесор обробки (проводки) тканин для гістології. Перевагою сучасних апаратів є також системи контролю шкідливих випарів.

Товщина парафінових зрізів не повинна перевищувати 5-7 мк, що вимагає використання сучасних мікротомів.

Мал. 1, 2. Шкіра з тонким епідермісом при типовою електрометкі. Шестигранні дефекти в роговому шарі. Виражене (аж до нитевидного) витягування в довжину ядер клітин базального шару епідермісу, вертикальна і косо-вертикальна їх орієнтація. Вогнищеві розщеплення, розриви епідермісу. Тонкі зрізи рівномірної товщини. Забарвлення: гематоксилін і еозин. Збільшення х100 і х250.

Мал. 3. Виражене (аж до нитевидного) витягування в довжину ядер клітин базального шару епідермісу, вертикальна і косо-вертикальна їх орієнтація, ділянки з картиною фігур у вигляді «частоколу». Товстий зріз нерівномірної товщини. Забарвлення: гематоксилін і еозин. Збільшення х100 і х250.

Обов'язковою є оглядова забарвлення гістологічних зрізів всіх досліджуваних органів і тканин гематоксиліном-еозином. Додатково допускається використання всіх описаних в літературі гістологічних та гістохімічних методик.

Додаткові забарвлення по можливості слід призначати відразу після вирізки.

При переломах довгих трубчастих і плоских кісток, розтрощення м'яких тканин обов'язковою є забарвлення заморожених зрізів легких Суданом.

При дослідженні парадуральних гематом обов'язково використання забарвлення по Перлсу.

При субарахноїдальних крововиливах судини м'яких мозкових оболонок слід фарбувати на еластичні волокна (по Вейгерту, орсеїном або за іншою методикою).

При переживанні ЧМТ і в інших ситуаціях, що можуть призвести формуванням респіраторного дистрес-синдрому слід проводити забарвлення зрізів легких на фібрин.