Приготування і фарбування мазка

Мазок - основний об'єкт вивчення цитологічної картини, тип цитологічної проби, приготовленої за допомогою розмазування зразка, його фіксації і фарбування перед дослідженням. Для приготування цитологічного препарату необхідно використовувати нові стандартні тонкі сухі знежирені скла.

Параметри стандартно приготованого мазка:
• Початок мазка - на відстані 1-1,5 см від вузького краю предметного скла, кінець - на відстані 2-2,5 см від іншого його краю. При дослідженні рідкого матеріалу (рідини серозної і кістозної порожнини, змиву) мазок з осаду повинен закінчуватися у вузького краю предметного скла у вигляді зубчастого сліду (щіточки).
• Мазок повинен бути максимально тонким (наближеним до однослойному), рівномірної товщини на всьому протязі.
• Мазок не повинен досягати довгого краю предметного скла на відстані 0,2-0,3 см.

При невиконанні умов приготування отримують товстий, нерівномірний (хвилеподібний) мазок, що містить недоступні детальному вивченню (непросматріваемие) грубі скупчення або комплекси клітин. Він стає неінформативним, і його дослідження веде до «пропуску» важливою діагностичної інформації на предметному склі, а при відсутності корригирующей клінічної інформації - до помилкової оцінки цитологічної картини, а значить, до неповноцінного або помилкового діагнозу.

Саме тому приготування стандартного мазка важливо приділяти особливу увагу і при необхідності постійно навчати цьому співробітників клінічних відділень, які беруть участь в отриманні матеріалу для цитологічного дослідження.

ФІКСАЦІЯ І ФАРБУВАННЯ МАЗКА
У практиці вітчизняних лабораторій фіксацію мазка частіше здійснюють в два етапи: після висушування на повітрі застосовують спиртовий фіксатор. В даний час в ряді лабораторій застосовують фарбування мазків по Папаніколау. Це фарбування вимагає вологого фіксації мазка, т. Е. Відразу після отримання матеріалу ще вологий мазок фіксують спеціальними аерозолями, крапельними фіксаторами або занурюють на 10-15 хв у 96 ° етанол.

У більшості лабораторій країни для фарбування використовують АЗУР-еозином (за Романовським, Паппенгейма, Лейшману) на «сухому» (висушеному на повітрі) мазку. Все більше застосування в цитологічної діагностики знаходить рідинна цитологія, коли на цітоцентріфуге або в автоматичному приладі для обробки матеріалу рідинної цитології готують стандартні тонкошарові мазки. Методика має ряд переваг перед традиційним приготуванням мазків, перш за все тому, що весь отриманий матеріал переносять в фіксуючу рідину і з нього при необхідності готують мазки повторно; можна відразу або при труднощах встановлення цитологічного діагнозу зробити кілька препаратів для імуноцитохімічного дослідження.

Крім того, мазки, приготовлені методом рідинної цитології, зручні для мікроскопії (клітини розташовані на невеликій площі в один шар, чистий фон препарату), а фіксуючу рідину можна використовувати для проведення полімерної ланцюгової реакції та інших молекулярних досліджень. Весь матеріал, отриманий при пункції, видувають у фіксуючий розчин, голку промивають цим розчином кілька разів.

Обрана методика фарбування мазка зумовлює спосіб фіксації матеріалу. Порушення методики фіксації веде до неякісного фарбування мазка.

Мета цих дій - отримати інформативний (адекватний) матеріал максимально швидко при найменшій кількості досліджень без шкоди для хворого, в певній послідовності застосувати найбільш ефективні і найменш інвазивні методи з урахуванням наступності інформації (кожний наступний спосіб призначають після отримання результатів попереднього), перевагу віддають одномоментним комплексним дослідженням. При цитологічному дослідженні у хворого вихідною позицією служать клініко-інструментальні дані: локалізація ураження в органі (тканини), інформація про поширеність і інші особливості перебігу патологічного процесу.

рідинні ЦИТОЛОГІЯ
Кращий спосіб обробки матеріалу для цитологічного дослідження - метод рідинної цитології.

Матеріал, отриманий при пункції, поміщають в спеціальну рідку середу і доставляють в лабораторію. Для приготування препаратів певну кількість рідини поміщають в спеціальні пробірки, з'єднані зі склом, і обробляють на цітоцентріфуге. Препарати, виготовлені таким способом, одношарові. Матеріал розподілений рівномірно на відносно невеликій поверхні, що забезпечує зручність в його вивченні. Після приготування препарату методом рідинної цитології мазки забарвлюють по Папаніколау або гематоксилін-еозином.

Переваги методу рідинної цитології:
• можливість приготування без повторної пункції великої кількості однакових цитологічних препаратів хорошої якості;
• скорочення часу вивчення цитологічного препарату за рахунок зменшення площі вміщеного на скло матеріалу (всім цитопатології знайомі не дуже приємні відчуття при необхідності вивчення великої кількості малоклеточних препаратів, приготованих традиційним способом);
• отримання додаткового матеріалу для подальших діагностичних, прогностичних і наукових досліджень;
• економія дорогих реактивів, необхідних для додаткових методів дослідження.