Лабораторна діагностика сибірки - студопедія

Приготовленої суспензією заражають внутрішньочеревно трьох білих ми-шей живою масою 14-16 г в дозі 0,5 млрд. Мікробних клітин
(0,5 см 3). Патогенність вважають встановленої, а досліджувані штами протея відно-сят до збудника хвороби в разі загибелі двох і більше мишей протягом трьох діб після зараження.

Сибірська виразка (Anthrax) - остропротекающая хвороба, що характеризує-ся ознаками септицемії, інтоксикації, освітою карбункулів. До сі-Бірської виразці сприйнятливі велика рогата худоба, коні, інші одноко-питние, верблюди, олені, дикі травоїдні всіх видів. Менш чутливих-тельно свині, м'ясоїдні - малочутливі.

Збудником хвороби є грамположительная, спороутворююча паличкоподібна бактерія - Bacillus anthracis. рід Bacillus.

Лабораторна діагностика заснована на виділення та ідентифікації культури возбуди-теля, в разі необхідності проводять виявлення антигенів збудників-ля в досліджуваному матеріалі.

Бактеріологічне дослідження. Матеріал для дослідження. Прижиттєво у хворої тварини беруть кров (зазвичай з вуха). Краплі крові наносять у вигляді товстого мазка на предметні скельця, підсушують, скла складають мазками всередину, поміщають між ними сірники. Від трупа тварини беруть вухо або мазок крові з судин вуха. Від трупів свиней - ділянки набряку сполучної тка-ні, заглоткові, підщелепні та інші лімфатичні вузли, при нали-ності в них змін. Вухо відрізають з боку, на якій лежить труп, попередньо перев'язавши двома лігатурами, між якими роблять раз-рез. Місце відрізу припікають. Якщо підозра виникла в ході розтину трупа (крім трупів свиней), розтин припиняють, для дослідження бе-рут шматочки селезінки, печінки, змінені лімфатичні вузли. Матері-ал поміщають в скляний посуд (банки, пробірки). Мазки після вису-вування кладуть в чашки Петрі, останні загортають в папір, на ній роблять напис «Мазок нефіксованим!». Посуд з матеріалом поміщають у влагонепроницаемую тару, опечатують і нареченим з відповідним-щим супровідним документом направляють в лабораторію. Для виявлення збудника сибірської виразки у сировині тваринного походження та об'єктах зовнішнього середовища відбір матері-ала і хід бактеріологічного дослідження регламентований відпо-ствующими методичними вказівками.

Мікроскопічне дослідження вихідного матеріалу. Проводять шляхом мікроскопії мазків, забарвлених по Граму, а також од-ним з методів на капсулу: метиленовим синім Леффлера, за Романовським-му - Гімза, Міхіну, Ольто, Ребігеру. З огляду на небезпеку досліджуваного матеріалу для бактеріолога, рекомендується фіксувати мазки етиловим спиртом з перекисом водню, що забезпечує інактивацію збудників-ля. З цією метою підсушені на повітрі мазки витримують 30 хвилин в фіксує рідини: 180 мл етанолу 96 ° і 20 мл 30% -ного пергідролю.

Збудник в мазках, пофарбованих за Грамом, представляє велику грамположительную паличку (5-10 х 1-2 мкм) з закругленими кінцями (поодинокі клітини). У матеріалі клітини розташовуються переваж-громадської у вигляді коротких ланцюжків, попарно. Кінці клітин, звернені один до одного, мають обрізані під прямим кутом кінці. У матеріалі від свиней форма клітин може бути атипової: короткі, товсті або зігну-ті палички, іноді зернисті зі здуттям на кінці або середині клітини. У несвіжому матеріалі лізис клітин може призвести до виявлення в маз-ках «тіней мікробів», що представляють більше стійкі до гниття кап-сули збудника. У препаратах, забарвлених спеціальними методами, клітини оточені капсулою, у парних клітин і в коротких ланцюжках вона загальна для декількох клітин. При фарбуванні метиленовим синім Леффлера клітини синього кольору оточені рожевим Капсулярна матеріалом, що вва-шається характерним для B.anthracis. У мазку, пофарбованому за методом Гімзи, капсули бледномалінового кольору.

В організмі тварини, в нерозкритими трупах збудник суперечки не утворює, для їх формування потрібні: доступ кисню, темпера-туру 26-30 ° С, нейтральна або слаболужна реакція навколишнього середовища.

В мазках з матеріалу при мікроскопічному дослідженні можуть бути виявлені клітини морфологічно подібних бактерій, наприклад - C.perfringens (великі, грампозитивні, капсулообразующие).

Клітини В. anthracis можуть бути диференційовані від C.perfringens ок-Раск препаратів за Романовським. При цьому капсула В. anthracis має майже прямокутну форму, чіткий контур, червоно-ліловий колір, а капсула С. perfringens має овальну форму і блакитний колір.

При наявності сибіркових люминесцирующих сироваток препара-ти фарбують ними в прямому варіанті МФА. Наявні люмінесцентними-ні сироватки дають перехресні реакції з В. cereus. Виявлення в маз-ках світяться клітин дозволяє підозрювати наявність у матеріалі возбу-дителя сибірської виразки.