Якісні реакції на гормони

Реактиви та обладнання: 1. 10% розчин NaOH; 2. 1% розчин CuSO4; 3. HNO3 - (конц.); 4. (NH4) OH - (конц.). 5. 1% розчин Pb (CH3 COO) 2; 6. 1% розчин FeCl3; 7. 1% розчин йодату калію (KIO3); 8. 10% розчин CH3 COOH; 9. 1% розчин сульфаниловой кислоти; 10. 5% розчин NaNO2; 11. 10% розчин Na2 CO3; 12. 10% розчин сахарози; 13. H2 SO4 - (конц.); 14. Хлороформ; 15. Інсулін; 16. Розчин адреналіну, 0,1% розведення (1:10); 17. Тиреоидин; 18. Спиртовий розчин фолликулина або кортизону-ацетату; 19. Пробірки; 20. Водяна баня; 21. Штативи для пробірок.

Якісні реакції на інсулін.

Кольорові реакції на інсулін, які доводять його білкову природу: а) биуретовая реакція; б) ксантопротеїнова реакція на циклічні амінокислоти (фенілаланін, тирозин і триптофан);

в) реакція на слабо зв'язаної сірку (цистеїн, цистин). Див. Заняття «Кольорові реакції на білки».

1. Біуретова реакція

Хід роботи: до 5 крапель інсуліну додати 5 крапель 10% розчину їдкого натру і 1 краплю (надлишок заважає читанню результатів реакції.) 1% розчину сірчанокислої міді. Рідина забарвлюється в фіолетовий колір.

2. Ксантопротеиновая реакція

Хід роботи: до 5 крапель інсуліну додати З краплі концентрованої азотної кислоти; утворюється осад білка, який при обережному нагріванні на водяній бані забарвлюється в жовтий колір. До охолодженої пробі (.) Додають надлишок аміаку - з'являється оранжеве забарвлення внаслідок утворення хіноїдному похідного тирозину.

3. Реакція Фоля на слабо зв'язаної сірку

Хід роботи: спочатку денатурируют білок, додаючи до 5 крапель розчину інсуліну 1% розчин оцтовокислого свинцю по краплях до випадання осаду. Потім також по краплях додають 10% розчин NaOH до повного просвітлення рідини (розчинення осаду денатурованого білка). Пробірку нагрівають в киплячій водяній бані, поки розчин не забарвиться в темний (чорний) колір за рахунок утворення осаду сульфіду свинцю.

Якісні реакції на адреналін.

Обумовлені наявністю кільця пірокатехіна в його молекулі.

1. Реакція з хлорним залізом: адреналін, в молекулу якого входить фенольное кільце, утворює з хлорним залізом з'єднання типу фенолята.

Хід роботи: у пробірку внести 2 - 3 краплі розчину адреналіну (1:10) і 1 краплю 1% розчину хлорного заліза. Рідина забарвлюється в смарагдово-зелений колір, що переходить при стоянні в жовтий.

2. Реакція з йодатом калію (KIO3): продукти хіноїдному окислення адреналіну забарвлюють розчин адреналіну в кольори від рожевого до бурого. В умовах досвіду адреналін окислюється а пігмент - галохром, має червоно-фіолетове забарвлення.

Хід роботи: у пробірку внести 2 - 3 краплі розчину адреналіну (1:10), 2 краплі 1% розчину йодату калію і 2 краплі 10% розчину оцтової кислоти. При легкому нагріванні з'являється червоно-фіолетове забарвлення.

3. діазореакція: при взаємодії адреналіну з диазореактивом утворюється азокраситель червоного кольору.

Хід роботи: у пробірку внести З краплі 1% розчину сульфаниловой кислоти, 3 краплі 5% розчину азотистокислого натрію, 5 крапель адреналіну (1:10) і 3 краплі 10% розчину вуглекислого натрію. Рідина забарвлюється в червоний колір.